中文名:环巴胺
CAS:4449-51-8
品牌:MedChemExpress (MCE)
存储条件:Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.
生物活性:Cyclopamine 是一种 Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂,在 Hh 细胞试验中的 IC50 为 46 nM。 Cyclopamine 也是一种选择性 Smo 抑制剂。 IC50 和目标:IC50:46 nM(Hedgehog,在 Hh 细胞试验中)[1]
体外:使用小分子 Hh 抑制剂(如 HhAntag 和天然产物环巴胺)治疗,两者均与 Smo 结合,在髓母细胞瘤基因小鼠模型中诱导肿瘤缓解[1]。 Cyclopamine 是一种 Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂。环巴胺抑制细胞生长。 Cyclopamine (3 μM) 抑制消化道肿瘤细胞系中 Hh 通路的活性和生长与 PTCH mRNA[2] 的表达相关。 Cyclopamine 是一种甾体生物碱,可通过与 Smo[3] 的直接相互作用抑制 Hh 信号传导。
体内:Cyclopamine 导致异种移植肿瘤持久消退。 Cyclopamine 处理的动物体内的肿瘤在 12 天后完全消退[2]。 Cyclopamine (1.2 mg) 治疗可阻断移植到裸鼠体内的人胰腺癌细胞的肿瘤形成[3]。
细胞试验:将细胞在 96 孔板中的测定培养基中一式三份培养,在 0 小时以正文中所示的浓度向其中添加 5E1 单克隆抗体、ShhNp 和/或环杷明 (3 μM)。使用 CellTiter96 比色测定法在第 2 天和第 4 天在 490 nm (OD490) 处测量光密度来确定活细胞质量。相对生长的计算方式为 OD(第 4 天)-OD(第 2 天)/OD(第 2 天)[2]。
动物体内实验:小鼠[3] 将总共0.1 mL Hanks'平衡盐溶液和含有2×106个细胞的基质胶(1:1)皮下注射到CD-1裸鼠体内。肿瘤生长 4 天至最小体积 125 mm3;所有受试者同时开始治疗。每天向小鼠皮下注射单独的载体(三油酸甘油酯:乙醇 4:1 v/v)或环杷明悬浮液(每只小鼠 1.2 毫克三油酸甘油酯:乙醇 4:1 v/v),持续 7 天。治疗期结束时,从小鼠身上切除肿瘤,称重,然后用 4% 多聚甲醛在 4°C 下固定 3 小时,包埋在石蜡中并切片(6 µm)。使用重组 Tdt 通过 TUNEL 鉴定凋亡细胞。然后用伊红对切片进行复染。随机选择来自对应于两个对照和两个环杷明治疗的肿瘤的外部、中部和内部的区域的八个×20放大视野。我们手动计数 TUNEL 阳性细胞核的数量。进行苏木精/伊红染色。
参考详情:www.medchemexpress.cn/Cyclopamine.html
参考文献:
[1]. Qi Wan, et al. Overexpression of Laminin α4 Facilitates Proliferation and Migration of Fibroblasts in Knee Arthrofibrosis by Targeting Canonical Shh/Gli1 Signaling. Connect Tissue Res. 2020 May 24.
[2]. Berman DM, et al. Widespread requirement for Hedgehog ligand stimulation in growth of digestive tract tumours. Nature, 2003, 425(6960), 846-851.
[3]. Peukert S, et al. Identification and structure-activity relationships of ortho-biphenyl carboxamides as potent Smoothened antagonists inhibiting the Hedgehog signaling pathway. Bioorg Med Chem Lett, 2009, 19(2), 328-331.
[4]. Thayer SP, et al. Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis. Nature, 2003, 425(6960), 851-856.
[5]. Ma W, et al. Reduced Smoothened level rescued Aβ-induced memory deficits and neuronal inflammation in animal models of Alzheimer's disease. J Genet Genomics. 2018 May 20;45(5):237-246.