这是一个新系列
差不多是一年以前,我定导后没多久,接手了读研后的第一个课题。合作方是医院,和我对接的是一名博一的医学生,最开始两边的老师很排斥常规的单细胞文章思路,即各大类细胞分群、注释、描述,所以起初的几个月都在摸索一条主线,再后来有主线了,要加实验验证,周期有点长。我这边的分析基本做完。读研生活还在继续,我也不能太在意这一个课题,尽管有些时候我也很着急,尽管我在这个课题上花了很多时间。整理分析流程是个好习惯,最大的受益者还是自己,所以接下来我打算把我在处理单细胞转录组过程中,学到的用到的所有技能以这样的形式写出来,估计有二三十篇吧~
我想先从Cell Hashing这样一种改良的单细胞测序技术开始
1. CITE-seq
事实上Cell Hashing是在CITE-seq的基础上改进的,CITE-seq全称cellular indexing of transcriptomes and epitopes by sequencing,是一种同时对细胞内RNA和细胞表面蛋白进行测序的技术。
测序原理如上图,将特定的抗体连上一段序列,序列上包含与抗体信息对应的antibody barcode,像右上方表格一样