差异基因太多,除了GO富集分析,还能这样挑选关键靶标?

引言

差异分析后,如果鉴定到的差异基因偏少,我们可以从调整实验设计(选择表型有显著差异的样本、避免批次效应)、剔除异常样本(参考相关性热图、PCA)、降低筛选阈值(FC、P Value)更换分析软件(DESeq2、edgeR)等方面尝试解决。但如果鉴定到的差异基因太多,我们又该如何挑选关键靶标用于后续深入研究?本期将介绍另一种文献高频使用的方法——KEGG富集分析

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图1 文献中KEGG富集分析的可视化

KEGG富集分析是基于KEGG数据库给定基因集进行功能注释和富集分析的方法,通过统计学算法(如超几何分布、Fisher精确检验等)计算给定基因集在不同KEGG pathway中的富集程度和显著性。与GO富集分析相比,KEGG富集分析更侧重于展示分子间代谢通路以及信号传导网络。借助KEGG富集分析,我们可以有效将表型-通路-基因联系起来,并挑选显著富集的KEGG pathway中差异基因作为后续研究的靶标参考。更重要的是,KEGG富集分析能与GO富集分析优势互补,全面阐释基因功能,深入挖掘分子机制。

KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库是一个整合了基因组、生化代谢、信号转导、疾病药物、健康等信息的综合数据库,通过利用分子水平的信息,特别是来自高通量测序的数据,充分挖掘生物系统高级功能和效用KEGG富集分析主要利用的是“KEGG PATHWAY”KEGG PATHWAY是一组手动绘制的通路图,展现包括新陈代谢、遗传信息处理、环境信息处理、细胞过程、有机体系统、人类疾病、药物开发方面的分子互作、反应和关系网络

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图2 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes

我们可以从知乎、B站、微信公众号等渠道获取KEGG富集分析实操的学习资料,但通常还需额外下载软件学习代码。“担心基础”或“想快速入手”的同学们还可以尝试使用康测科技云分析平台3分钟左右的视频教学、零代码实现轻松上手。

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图3 B站上的大神教学

KEGG富集分析云工具提供2种高频使用软件Kobas和clusterProfiler用于KEGG富集分析结果的可视化,支持气泡图和柱状图2种不同的展现形式。物种和基因组版本、P值大小、通路展示个数、Term字体大小、图片大小均可自由选择/设置。此外,文献中展示的弦图、桑基图、圈图、网络图等也有相应的云工具。

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图4 康测KEGG富集分析的可视化

康测科技云分析平台试用

康测科技云分析平台整合超过100种组学分析工具,配备详细、精炼的讲解视频和工具文档,全程零代码自主参数设置。如果您有KEGG富集分析使用需求,可私信小编,小编将给您发送试用账号

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