LTRharvest
是一个检测和提取长末端重复序列(LTR,Long Terminal Repeat)逆转录病毒的工具,通常用于基因组序列分析,特别是在植物和动物基因组中鉴定LTR逆转录转座子。它是基于GenomeTools软件包的一个模块。
以下是使用 LTRharvest
的基本步骤和参数说明:
1. 安装GenomeTools
首先需要安装GenomeTools
。在大多数Linux系统上,使用以下命令可以安装:
sudo apt-get install genometools
如果你需要手动编译,也可以从GenomeTools官网下载源代码并按照说明进行安装。
2. 准备输入文件
LTRharvest
的输入通常是一个FASTA格式的基因组序列文件。
3. 运行LTRharvest
运行 LTRharvest
的基本命令格式如下:
gt ltrharvest -index genomefile -out ltr_candidates.fasta
其中:
genomefile
是预先用gt suffixerator
建立索引的基因组序列文件。ltr_candidates.fasta
是输出文件,包含预测的LTR序列。
4. 常用参数
-minlenltr
: 设置最小LTR长度。例如,-minlenltr 100
表示最小LTR长度为100个碱基对。-maxlenltr
: 设置最大LTR长度。-minlenltr
: 设置LTR元件(包含LTR和内部区间)的最小长度。-similar
: 设置LTR之间的最小相似性阈值,默认是80%。-mintsd
: 设置短重复序列(target site duplications, TSD)的最小长度,通常是4到6个碱基对。-maxtsd
: 设置TSD的最大长度。
5. 完整的工作流程
-
生成索引:
需要在运行LTRharvest
之前为你的基因组文件创建一个索引。可以使用gt suffixerator
来完成:gt suffixerator -db genome.fasta -indexname genomefile -tis -suf -lcp -des -ssp -dna
这将生成一个索引文件
genomefile
。 -
运行
LTRharvest
:
创建索引后,运行LTRharvest
检测LTR序列:gt ltrharvest -index genomefile -similar 85 -mintsd 4 -maxtsd 6 -out ltr_candidates.fasta
这会找到基因组中LTR相似度大于85%的序列,TSD长度在4到6个碱基对之间。
-
后处理和评估:
你可以使用其他工具如 LTRdigest 对预测的LTR序列进一步注释和分析。
6. 常用场景
- 基因组转座子分析:识别和提取基因组中的LTR转座子元件。
- 基因组注释:结合其它软件(如
RepeatMasker
)进行转座子相关的基因组注释工作。
通过结合参数优化,LTRharvest
可以用于检测各类LTR逆转录转座子,特别适合在复杂的植物或动物基因组中进行此类序列的识别。