hisat2比对_[转录组] HISAT2+Stringtie+DESeq2 = 转录本组装+差异分析

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前两天提到了最近在尝试HISAT2+Stringtie+DESeq2 的组合,感觉还是蛮好用的,deseq2的功能颇多,hisat2+stringtie的处理速度又快,是我现在最喜欢用的RNA-seq处理流程。

hisat2 和 stringtie 都可以在anaconda上直接安装,deseq2可以使用新的Bioconductor的安装方式:

if (!requireNamespace("BiocManager", quietly = TRUE))
    install.packages("BiocManager")
BiocManager::install("DESeq2", version = "3.8")

预处理:

和其他数据处理一样,先把sra文件转为fastq,可以使用seqtk对fastq进行自动的trim,但还是要先用FASTQC先看一下质量,太差的数据最好还是不要用。

同时还需要注释文件和基因组文件,下载地址:

iGenomes

这回我粗暴一点,直接给代码:

hisat2:

hisat2 -t -x /ref/mm10 
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