SUPPA是一款通过转录本定量来获取可变剪切定量结果的软件。转录本的定量方式有很多,例如count,FPKM, TPM等,作者建议使用TPM,因为先均一化了基因的长度,然后均一化了测序的深度。同时建议使用salmon软件进行定量
软件的下载与安装
首先下载salmon二进制版本
wget https://github.com/COMBINE-lab/salmon/releases/download/v0.14.0/salmon-0.14.0_linux_x86_64.tar.gz
tar zxvf salmon-0.14.0_linux_x86_64.tar.gz -C ../
下面使用小鼠的转录本来建立索引
wget ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-96/fasta/mus_musculus/cds/Mus_musculus.GRCm38.cds.all.fa.gz
gunzip Mus_musculus.GRCm38.cds.all.fa.gz
perl -lane 'if(/^>/){$id=(split/\./,$_)[0];print $id}else{print}' Mus_musculus.GRCm38.cds.all.fa >Mus_musculus.GRCm38.cds.all.format.fa
使用salmon建立索引
mkdir Mus_musculus.GRCm38.cds.index
export LD_LIBRARY_PATH=/media/sdb/user/yueyao/software/salmon-latest_linux_x86_64/lib:$LD_LIBRARY_PATH
/media/sdb/user/yueyao/software/salmon-latest_linux_x86_64/bin/