“单细胞”中研究APC/CCDH1失活调控细胞周期起始的分子机制

在单细胞测序高分文章满天飞的季节（有钱就是任性），对于辛辛苦苦做生物学实验的小伙伴来说有没有一些羡慕，嫉妒，恨呢。今天就和大家在这里分享一份福利，看大牛如何在单细胞水平玩转分子机制，做分子机制的同学们是否也想蹭蹭“单细胞”的热度了呢？这篇是2018年发表在Nature上的一篇关于细胞周期调控的文章。说起细胞周期大家一定再熟悉不过了，但是你真的很了解细胞周期吗？那就让我们来回顾一下吧。

哺乳动物细胞在G1期结束之前会决定是否进入和完成整个细胞周期活动。在细胞进入S期复制DNA之前，会激活CDKs，进而启动E2F转录和APC/C^CDH1（一个非常明星的E3泛素连接酶复合物）失活。最近发现一些应激条件可以逆转CDK2激活和E2F诱导表达（R point，restriction point，之前认为是细胞进入细胞周期不可逆的关键事件），但是在APC/C^CDH1失活后却无法逆转，提示APC/C^CDH1的失活才是一个决定细胞进入细胞周期不可逆的关键事件，但是APC/C^CDH1的失活和控制细胞周期这一关键步骤的分子机制不清。接下来就让我们看看这个问题是如何被解决的吧。

 

•        分子机制模型的预测和建立

Fig. 1 | EMI1 conveys hysteresis to APC/C CDH1 inactivation

 

由于APC/C^CDH1失活在MCF10A细胞（做乳腺癌的小伙伴应该很熟悉，MCF10A是一种未转化的乳腺上皮细胞）中具有滞后的特点（什么是“滞后”后面再讲），而这种滞后也是决定细胞不可逆的进入细胞周期所需要的，所以选用这种细胞来建立实验体系。一般来讲，细胞信号传导中双稳态的调控模式是需要滞后现象的（图1.a的4号，APC/C活性的曲线斜率基本不变，水平向右移动，即滞后。如果没有2号Feedback调控，只有1号Trigger蛋白的调控作用