【生物信息学】——Metagenomics宏基因组学分析流程浅谈

Metagenomics Pipeline

文章主要目的:多数读者在从事宏基因组学分析的学习过程中都会遇到的共性问题,就是目前有太多的乱七八糟的分析软件,其分析质量无法考究。很难总结出一套比较切实可靠的分析流程,笔者也深受其害。摸索之中浪费了大量时间成本,故写此文,供各位参考。

宏基因组分析软件规划:

  • 初始fasta.q文件

  • 1.组装阶段:Megahit/Spades

  • 2.质控阶段:CheckM

  • 3.注释阶段:Pgap

  • 4.预测阶段:waka

陈述选择原因:

  1. Megahit:笔者通过文章查阅并实践分析所得,该软件相对轻量,对内存要求相对较低,其组装质量同比之下属于中上。应用于linux系统,通过conda安装很方便。适合前期学习使用。Spades:属于重量级组装工具,优点:组装N50大,contigs片段长度和准确性更好,缺点:非常耗内存,对硬件要求较高,组装速度慢
  2. CheckM:指控阶段的不可或缺的软件,对去除末端,冗余等有很好的效果,大胆选用即可。
  3. Pgap:强大的NCBI注释工具,可以添加很多大型数据库进行比对分析,虽然安装上有一定难度,不过其功能还是可圈可点。值得注意的一点是,这款软件同样需要很好的机器配置作为先决条件,cpu及内存,特别是内存,一定要够,否则会内存溢出。
  4. weka:机器学习等模型预测工具,内置常用的贝叶斯,决策树等机器学习算法,操作相对容易,完全可以满足一般的功能基因预测。

 

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### 回答1: 微生物群落结构研究的非培养方法主要有以下几种: 1. 基于核酸的测序技术,包括16S rRNA基因测序、测序扩增子实验和全基因组测序。这些方法通过对样品中DNA或RNA的测序,可以对样品中的微生物种类进行鉴定,并对微生物群落结构进行分析。优点是可以鉴定出样品中的多种微生物,并可以精确地统计微生物的相对丰度,缺点是仅能鉴定出已知的微生物,无法鉴定新的微生物。 2. 基于蛋白质的测序技术,包括质谱测序和蛋白质组测序。这些方法通过对样品中蛋白质的测序,可以对样品中的微生物的功能进行分析,从而对微生物群落结构进行推断。优点是可以分析生物的功能,缺点是需要大量的样品,并且价格较高。 3. 基于菌落的测序技术,包括菌落单克隆测序和测序扩增子实验。这些方法通过对菌落中的单个微生物进行测序,可以精确地统计微生物的丰度。优点是可以精确地统计微生物的丰度,缺点是 ### 回答2: 微生物群落结构研究的非培养技术和方法主要包括分子生物技术和高通量测序技术。 分子生物技术是指利用PCR(聚合酶链反应)等方法检测微生物群落结构。优点是可以快速从环境样品中提取微生物DNA,避免培养过程中出现选择性偏差。然而,分子生物技术通常只能获得特定微生物的信息,无法全面了解整个群落的组成。 高通量测序技术是指通过对微生物基因组DNA进行大规模测序来获得微生物群落结构信息。优点是能够获得大量序列数据,可以全面了解微生物群落的组成和丰度。然而,高通量测序技术在处理大量数据时需要高性能计算资源和较长的分析时间,成本较高。 除了这些基础技术外,还有一些衍生的方法用于微生物群落结构研究,如扩增子序列分析(Amplicon sequencing)和元基因组Metagenomics)。扩增子序列分析通过对特定基因区域进行测序分析,可以较为准确地了解微生物群落的组成和物种多样性。元基因组则通过对微生物基因组进行整体测序,可以获得微生物功能潜能和代谢特征。然而,这些方法在分析结果的可信度和解释性方面还有待改进。 综上所述,微生物群落结构研究的非培养技术和方法具有快速、全面了解微生物群落组成和功能特征的优势,但也存在一些技术限制和成本较高的缺点。随着技术的不断发展,我们可以期待更多高效、准确的非培养技术的出现,以更好地研究微生物群落结构。

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