植物叶绿素测定

植物叶绿素测定方法：乙醇提取比色法[1]         

        将实验材料去除大主脉，在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中，依次加入20ml 95%的乙醇密封，在黑暗条件下室温提取24-36h，直至组织变白，随后用紫外可见分光光度计，在波长665、649和470 nm下分别进行比色。根据各波长的OD值（optical density（光密度）即为吸光度）计算叶绿素a、b和类胡萝卜素的浓度(mg/L)，根据求得的浓度再计算出各色素含量(mg/g鲜重表示)。[1]
叶绿素a含量   Ca=（13.95*A665-6.88*A649）

叶绿素b含量    Cb=（24.96*A649-7.32*A665）

类胡萝卜素含量   Cxc=（1000*A470-2.05*Ca-114.8*Cb）/245

求得色素的浓度后，再计算组织中色素的浓度：

叶绿体色素的含量（mg/g）=C*V/(W*1000)

其中：C：色素含量（mg/L）

V：提取液的体积（ml）。即为20

W：样品鲜重（g）。即为0.5

叶绿素总量=叶绿素a含量+叶绿素b含量

[1] 胡秉芬，黄华梨等. 分光光度法测定叶绿素含量的提取液的适宜浓度[J]. 草业科学, 2018, 035(008):1965-1974.