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摘要：pESC-TRP是一种6525bp的酵母表达载体，具有高拷贝特性，通过半乳糖诱导GAL1/GAL10启动子实现双基因表达。载体含多克隆位点、C-Flag/Myc标签、氨苄青霉素抗性及TRP1筛选标记，支持限制性内切酶克隆。其设计特点包括5'/3'测序引物和高效蛋白表达系统，适用于酵母基因功能研究和蛋白生产。

本文提供了11种SDS-PAGE凝胶电泳相关试剂的配制方法，包括30%和40%丙烯酰胺溶液、10%过硫酸铵溶液、5×Tris-Glycine缓冲液、5×SDS-PAGE上样缓冲液、考马斯亮蓝染色液及脱色液、银染固定液/处理液/染色液/显影液等。详细列出了各试剂的成分比例、配制步骤及保存条件（如4℃避光保存、现配现用等注意事项），为蛋白质电泳实验提供了完整的试剂配制方案。其中丙烯酰胺溶液需过滤除杂，银染试剂需现配现用，过硫酸铵溶液有效期为2周。

药用植物甾体皂苷生物合成途径研究进展 摘要：甾体皂苷是药用植物中的重要活性成分，具有多种药理活性。其生物合成主要通过MVA和MEP两条途径，以MVA途径为主。合成过程涉及HMGR、SS、CYP450、UGT等关键酶基因。本文综述了近5年甾体皂苷生物合成途径及其关键酶基因的研究进展，发现相关研究主要集中在基因克隆和功能鉴定，尚缺乏对催化机制和调控网络的深入认识。未来可结合合成生物学和代谢工程技术，通过基因组编辑和体外培养等手段提高甾体皂苷产量。该研究为甾体皂苷的开发利用提供了理论依据和技术参考。 关键词：药用

Western Blot（WB）蛋白质免疫印迹技术通过SDS-PAGE电泳分离蛋白质，再转膜至PVDF膜上进行抗原-抗体特异性检测。实验步骤包括制胶、电泳、转膜、封闭、抗体孵育和化学发光检测等关键环节，需严格控制温度（4℃操作）和抗体保存条件。该技术广泛应用于癌症研究、细胞生物学等领域，随着高通量检测、新型膜材料和定量分析软件的发展，WB技术的灵敏度和准确性持续提升。

摘要：超滤管是生物医学研究中分离纯化大分子物质的重要工具，通过半透膜的分子筛分作用实现蛋白质等大分子的浓缩与纯化。操作流程包括：清洗（氢氧化钠处理）、保存（4℃水储）及使用时的压力驱动分离。其工作原理基于膜孔径选择性和外部压力，可精准分离不同大小的分子。这种技术在蛋白质分析、核酸处理等研究中具有关键作用，显著提升了实验效率和准确性，是实验室的必备设备。（149字）

摘要：本文系统介绍了磁珠法核酸纯化的半自动化实践与优化方案。在PCR产物纯化方面，磁珠法通过标准化操作流程（包括乙醇沉淀、磁珠结合、洗涤和洗脱）实现高效回收，成本仅为柱纯化的1/3-1/5。RNA提取优化方案采用TRIZOL-磁珠联用法，显著提高微量样本回收率。磁珠（MagSilica Beads）凭借二氧化硅修饰表面和超顺磁性，在高盐条件下高效结合核酸，其载量＞10μg DNA/mg磁珠。该技术具有批量处理、操作简便和性价比高等优势，适用于PCR、载体构建等多种下游应用。

摘要：本文详细介绍了利用荧光原位杂交（FISH）技术检测组织中miRNA空间表达的实验流程。实验分为组织预处理、预杂交、探针杂交、洗涤和制片五个主要步骤，其中重点说明了4%多聚甲醛固定、探针稀释比例（1:50-1:2000）、56℃杂交12小时等关键参数。文章还提供了RNA杂交液的配方（含甲酰胺、SSC缓冲液等）和重要注意事项，包括固定时间控制（组织块4-12小时，载玻片样品≤15分钟）、甘氨酸使用等。该方法适用于30-80nt短探针检测，整个流程约需24小时完成。