JEM | 兰州理工任海伟等异常毕赤酵母和纤维素酶对甜高粱青贮过程的生物强化及球磨处理对青贮酶解的改善...-CSDN博客

兰州理工大学任海伟教授团队JEMA：异常毕赤酵母和纤维素酶对甜高粱青贮过程的生物强化及球磨处理对青贮酶解的改善

作者：任海伟，黎金莲

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.jenvman.2024.120327

摘要：兰州理工大学任海伟教授团队和Kansas State University郑毅教授报道了一种绿色高效的生物质联合预处理方法：通过异常毕赤酵母（P. anomala）和纤维素酶协同调控甜高粱的青贮品质和微生物群落，并联合球磨预处理进一步破坏其木质纤维素结构，提高酶解转化效率。

能源作物甜高粱富含纤维素和半纤维素，可作为生物能源的生产原料。然而，因其收获的季节性和时效性，需采取及时有效的贮存手段方可满足其规模化工业生产和全年可持续的原料供应。与此同时，复杂紧密的木质纤维素结构也会影响甜高粱的降解利用效率。因此，寻求一种即可有效改善甜高粱贮存品质，又能提高其生物转化效率的新策略至关重要。

近日，兰州理工大学任海伟教授团队和Kansas State University郑毅教授报道了一种绿色高效的生物质联合预处理方法：通过异常毕赤酵母（P. anomala）和纤维素酶协同调控甜高粱的青贮品质和微生物群落，并联合球磨处理破坏甜高粱的木质纤维素结构，最终提高酶解转化效率。研究表明，P. anomala与纤维素酶的复合添加能有效保存青贮甜高粱的有机成分，显著提高青贮品质，重构优化青贮微生物群落。进一步，生物强化青贮与球磨预处理的联合使用，可以促进甜高粱酶解效率显著提高至71%，比未处理原料提高1.37倍。

图文解读

P. anomala与纤维素酶对甜高粱青贮品质的调控影响

研究显示，在P. anomala和纤维素酶的协同调控作用下，青贮甜高粱的干物质损失率（LDM）显著降低，可溶性碳水化合物（WSC）得以有效保存，中酸性洗涤纤维（ADF）、中酸性洗涤纤维（NDF）、纤维素（CL）和棕纤维（HoC）等木质纤维组分含量显著低于对照组和其他处理组。说明以具有广谱抑菌活性的P. anomala和良好降解活性的纤维素酶作为添加剂进行生物强化青贮，可以有效破坏木质纤维网络结构的抗降解屏障作用，进而提高青贮甜高粱的生物降解性能，这对其后续生物转化效率的提高极为有利。

另一方面，P. anomala和纤维素酶的协同作用促使青贮甜高粱的pH值、氨氮值（AN）、乳酸（LA）含量均处于优质青贮范围，且显著优于其他处理组。说明二者协同强化作用可以保障甜高粱的青贮发酵进程和良好品质。

P. anomala与纤维素酶对青贮甜高粱微生物群落结构的影响

通过对青贮过程中细菌群落组成分析，发现P. anomala和纤维素酶（PA+CE）的添加明显有利于厚壁菌门（Firmicutes）取代变形菌门（Proteobacteria）成为优势菌，明显促进乳酸菌（Lactobacillus，13.19% ~ 58.75%）取代肠杆菌（Enterobacter，7.60% ~ 19.93%）成为优势菌（图1）。说明P. anomala和纤维素酶的协同生物强化作用有助于推动甜高粱向成功青贮的方向发展，并有效改善微生物群落结构，形成良好微生态体系。

图1. 添加剂对青贮甜高粱细菌群落组成的影响（a）门水平（b）属水平（SS：甜高粱原料组；CK:无添加剂青贮组；CE：纤维素酶青贮组；PA：异常毕赤酵母青贮组；PA+CE：P. anomala与纤维素酶协同强化组）。

球磨预处理对青贮甜高粱的微观结构影响

孔径越小、比表面积越大、总结晶指数（TCI）越低，代表生物质微观结构的破坏程度越大，越有利于酶解糖化的进行。该研究中，P. anomala和纤维素酶协同强化青贮预处理联合球磨预处理（BMPA+CE）对甜高粱微观结构的解聚效果最佳，与其对应的青贮预处理组（PA+CE）相比，孔径降低30.60%、比表面积提高108.2%、TCI降低13.33%（图2）。

图2. 球磨预处理前后青贮甜高粱孔径（a）和比表面积（b）的动态变化（SS：未青贮和未球磨原料组；CK：无添加剂青贮组；CE：纤维素酶青贮组；PA：异常毕赤酵母青贮组；PA+CE：P. anomala与纤维素酶协同强化组；BMCK：无添加剂青贮与球磨联合处理组；BMCE：纤维素酶青贮与球磨联合处理组；BMPA：P. anomala青贮与球磨联合处理组；BMPA+CE：P. anomala与纤维素酶协同强化与球磨联合处理组）。

球磨预处理对青贮甜高粱酶解效率的影响

还原糖作为下游生物燃料生产的底物，酶解糖化所得还原糖产量反映了生物质预处理的有效性。该研究中，与单独青贮预处理相比，青贮与球磨相结合的联合预处理能显著提高甜高粱的酶解效率（EHE），其中BMPA+CE组所获EHE最高为71%，分别比PA+CE组、SS组高出17%和137%（图3）。说明P. anomala和纤维素酶协同强化青贮联合球磨能有效增强预处理的协同效应，进一步提高甜高粱的酶解效率。

图3. 球磨预处理对青贮甜高粱酶解效率的影响（a）青贮7天，（b）青贮14天，（c）青贮21天，（d）酶解第72 h时的效率。

总结

该团队通过研究异常毕赤酵母（Pichia anomala）、纤维素酶及其二者组合作为添加剂对甜高粱青贮品质及微生物多样性的影响，及比较单独青贮与青贮联合球磨对酶解糖化效果的影响，认为以异常毕赤酵母和纤维素酶作为复合添加剂的生物强化青贮能显著改善甜高粱的青贮品质，联合球磨预处理能够进一步提高甜高粱的生物降解效率。该联合策略可作为甜高粱保质贮存和提高酶解性能的一种创新方法，将为甜高粱的能源转化利用提供理论参考。

该研究以“Bioaugmented ensiling of sweet sorghum with Pichia anomala and cellulase and improved enzymatic hydrolysis of silage via ball milling”为题发表于Journal of Environmental Management。兰州理工大学生命科学与工程学院教授任海伟、硕士研究生黎金莲为共同第一作者，Kansas State University郑毅教授为通讯作者。感谢甘肃省自然科学基金重点项目 (21JR7RA203)和国家自然科学基金 (51666010)等项目资助。兰州理工大学为第一完成单位。

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