诺禾-蛋白表达纯化之通关技巧

拿到一个蛋白以后，首先需求对蛋白停止全面的理解，所谓知彼知己方能百战不殆：

1. 蛋白二级构造预测：蛋白质的二级构造能够提供蛋白质的 α 螺旋、β 折叠和柔性区的散布状况。
   http://www.compbio.dundee.ac.uk/jpred/

2. 跨膜区预测：蛋白质的跨膜区的位置预测有助于我们理解蛋白质共有几次跨膜，肯定胞外域和胞内域的位置。
   http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0/

3. 信号肽预测：蛋白质的信号肽预测有助于我们理解蛋白质的一些特性，例如蛋白能否为分泌蛋白。
   http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/

4. 糖基化位点预测：糖基化位点预测，在蛋白的表达和结晶过程中有重要参考意义。
   http://www.cbs.dtu.dk/services/NetOGlyc/

5. 理化性质剖析：蛋白质的理化性质有助于我们理解蛋白质的局部特性，有助于蛋白质的纯化。
   https://web.expasy.org/protparam/

6. 亲水性疏水性剖析：剖析蛋白的亲水性和疏水性，为选择纯化办法提供参考。
   https://web.expasy.org/cgi-bin/protscale/protscale.pl

俗话说的好，能表达的蛋白千篇一概，不表达的蛋白各有不同。这蛋白不表达的缘由有很多，能够从以下几点思索：

载体构建能否适宜——检查启动子、读码框、终止子等。某些基因含有许多稀有密码子，特别是起始密码子后15 个碱基内的，会显著影响蛋白的表达。

表达系统能否恰当——常见的有四大表达系统&#