外泌体在维持癌症抗性中的主要作用

据研究报道，很多癌细胞分泌的外泌体 (Exosome)  比正常细胞分泌的多 10 倍以上。外泌体参与了癌症的发生、进展、转移和耐药性，并通过转运蛋白和核酸，建立与肿瘤微环境的关系。

图 1. 外泌体在维持癌症抗性中的主要作用 

外泌体含有丰富的蛋白质，除了其来源细胞从头合成的蛋白，还包含其它细胞的蛋白，并具有以下特性，使其有希望成为用于癌症监测和功效评估的生物标记。

1、外泌体中与癌症相关的蛋白、脂质、mRNA、非编码 RNA、DNA 可用于检测癌症；

2、外泌体体积小，具有优越的穿过各种组织屏障的能力，比如血脑屏障、且广泛存在于各种体液中，便于获取和检测；和合成的纳米颗粒相比，外泌体具有更好的生物相容性和生物可降解性，因此具有低毒性和低免疫原性；外泌体在肿瘤细胞内的粘附性和内化性比同等大小的脂质体高 10 倍，表明外泌体对癌症的靶向性更高；

3、外泌体的脂质双分子层结构可有效保护其内容物不被血液循环中的酶降解。有研究报道，冷冻 5 年的外泌体中仍然可以分离出完好的磷酸化蛋白；

4、血液中的成分很复杂，癌细胞分泌的特定蛋白等生物分子在血液中被稀释，因此在早期阶段或其含量较低时，不容易被检测到，但外泌体有膜包裹，且可被完整分离出来，其携带的分子不会被稀释；

5、外泌体和与肿瘤靶向蛋白、多肽或抗体一起进行基因工程编辑，用于更佳精准的治疗药物的递送。

       据统计，每毫升血液中含有超一亿个外泌体，其数量和组成特性有利于早期癌症的诊断。以肺癌为例、血小板来源的外泌体已被证明可促进癌细胞的生长和转移。肾细胞来源的外泌体可促进肺癌合并腹水患者血管的生成。2015 年，J Extracell Vesicles (IF=14.976) 报道了一项非小细胞肺癌 (NSCLC) 相关研究，该研究共纳入 109 位 IIIa-IV 期  NSCLC  患者及 110 位对照人群的血液样本数据，研究发现，在这些晚期 NSCLC 患者体内，CD317 和 EGFR 在外泌体表面丰量表达。

       2016 年，J Thorac Oncol (IF=13.357) 报道的一项临床研究共纳入 581 例 (431 位 NSCLC 患者以及 150 个对照群体) 血液组织样本，研究发现，和对照组相比，患者体内的 CD171，CD151 和 Tetraspanin 8 蛋白显著高表达，在鳞状细胞癌和小细胞肺癌患者中，CD151 也是独立的生物标志物。这些分子都有望成为早期肺癌检测的生物标志物。

图 2. 外泌体标记物

外泌体中非编码 RNA 的研究也越来越火热，例如转移性胃癌细胞系 AZ-P7a 通过外泌体释放 let-7 miRNA (肿瘤抑制 miRNA) 进入细胞外环境中，从而维持肿瘤发生进程。外泌体来源的 miR-198、miR-26a、miR-34a 和 miR-494 在 MCF-7 乳腺癌细胞系中丰量表达，而 miR-130a、miR-328–5p 和 miR-149-3p 在 MDA-MB-231 乳腺癌细胞系中表达量很高。这些 miRNA 都有潜力成为乳腺癌诊断的生物标记分子。

外泌体WB鉴定

CD81外泌体慢病毒包装

CD63外泌体慢病毒包装