金属骨架MOF-PTP1B/mMOF@Au@GSH偶联聚合物/蛋白的分析过程
金属-有机骨架(MOF)是一种以金属或金属离子为结点,以多配位点的有机配基为连接点,通过配位作用自组装而成的具有高度规整的网状骨架。今天小编分享金属骨架MOF-PTP1B,一起看看吧:
标记过程:
PTPIB实验体系由去磷酸化体系和Ti-MIL125-NH2材料体系两部分组成。在去磷酸化体系中,将1定量的mj水、Tris-HC1、L-天冬氨酸(终浓度1 mM)、FITC-DADEpYLIPQQG(终浓度0.2 uM)和1定浓度的PTPIB加入到1.5 mL离心管中,总体积为150 uL,平行准备三份。然后将其放入已预热的摇床中避光孵育1h(30°℃,180 rpm)进行去磷酸化反应。材料体系由390 uL ACN和60 uLACN分散的Ti-MIL125-NH2 (2 mgmL')组成。去磷酸反应完成后,将去磷酸体系与材料体系均匀混合后在室温下共孵育1 h之后使用离心机离心(10000 rpm)5 min去除体系中的上清液。后将材料捕获的没有被PTPIB酶切去磷酸基团的多肽用等体积的0.5 %氨水洗脱到溶液中,进行荧光光谱分析。使用FTC特征的494nm的激发波长和520 nm的发射波长在荧光分光光度计上对荧光信号进行检测分析。
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HRSWRL2022.12