Coppersensor-1 (CS1) 是一种可透过膜的荧光染料 | MedChemExpress (MCE)

Coppersensor 1

CAS：874748-20-6

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Pure form: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Coppersensor-1 (CS1) 是一种可透过膜的荧光染料+ 具有皮摩尔亲和力，对竞争性细胞金属离子具有高选择性。 Coppersensor-1作为探针，可以选择性、灵敏地检测生物样品（包括活细胞）中的铜（I）离子（Cu+）。 Coppersensor-1可用于癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等严重疾病的影像学研究[1]。

体外：指南（以下是我们推荐的方案，本方案仅提供一个指南，应根据您的具体需要进行修改）。
A. 成像试剂储备液的制备：
1. 制备1 mM通过在每毫升 DMSO 溶剂中溶解 0.63 mg 固体 CS1，在 DMSO 中制备 CS1（MW 630 g/moL）储备液。
2. 制备 10 mM CuCl2 储备液（MW 134 g/moL)，每毫升 Millipore 水溶剂中溶解 1.34 mg 固体 CuCl2。
3. 制备 100 mM 的 N-ethyl-3,6,12 储备液， 15-tetrathia-9-monoazheptadecane (4, MW 342 g/moL) 在 DMSO 中，每毫升 DMSO 溶剂中溶解 34.2 mg 液体螯合剂。
B. 活细胞的 CS1 标记：
1.细胞成像实验需要 1-2 天的培养细胞。根据您的正常方案孵育细胞。
2. 成像前一天，细胞传代并接种在涂有聚-L-赖氨酸 (50 μg/mL) 的 18-mm 玻璃盖玻片上。用于成像的贴壁细胞生长至 50-80% 汇合度。
3. 从培养箱中取出细胞，将一张盖玻片转移到含有 3 mL PBS 缓冲液的 35-mm 培养皿中。
4. 到培养皿盘中，添加 15 μL 的 1 mM CS1 库存溶液，使最终染料浓度为 5 μM。充分混合。
（较高浓度的染料可能会导致高水平的背景荧光）
5. 在 25 或 37℃ 的黑暗中孵育 5-20 分钟。
C. 成像CS1 标记的细胞：
1. 在标准共聚焦显微镜下以 543 nm 激发成像。
（CS1 可以使用任何类型的荧光显微镜成像，包括落射荧光、共聚焦和多光子）

参考文献：

[1]. Evan W Miller, et al. Preparation and use of Coppersensor-1, a synthetic fluorophore for live-cell copper imaging. Nat Protoc. 2006;1(2):824-7.
[2]. Li Zeng, et al. A selective turn-on fluorescent sensor for imaging copper in living cells. J Am Chem Soc. 2006 Jan 11;128(1):10-1.