Ruxolitinib (INCB18424) 是一种有效的选择性 JAK1/2 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

中文名：芦可替尼

CAS：941678-49-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Ruxolitinib (INCB18424) 是一种有效的选择性 JAK1/2 抑制剂，无细胞试验中的 IC50 分别为 3.3 nM 和 2.8 nM，对 JAK1/2 的选择性是 JAK3[1] 的 130 倍。 Ruxolitinib 诱导自噬，并通过毒性线粒体自噬[3] 杀死肿瘤细胞。 IC50 和靶标：IC50：3.3 nM (JAK1)，2.8 nM (JAK2)  

体外：Ruxolitinib 有效且选择性地抑制 JAK2V617F 介导的信号传导和增殖，以剂量依赖性方式显着增加细胞凋亡，并且在 64 nM 时导致 Ba/F3 细胞中具有去极化线粒体的细胞加倍。
Ruxolitinib 显示出显着的抗红细胞作用集落形成，IC50 为 67 nM，并抑制正常供体和真性红细胞增多症患者红细胞祖细胞的增殖，IC50 值分别为 407 nM 和 223 nM[1]。

体内：Ruxolitinib（180 mg/kg，口服，每天两次）导致第 22 天时的存活率超过 90%，并显着降低脾肿大和炎症细胞因子的循环水平，并优先消除肿瘤细胞，从而显着延长存活时间，而无骨髓抑制或JAK2V617F 驱动的小鼠模型中的免疫抑制作用[1]。
在 Ruxolitinib 组中，41.9% 的患者达到主要终点，而安慰剂组为 0.7%在骨髓纤维化的双盲试验中。 Ruxolitinib 可维持脾脏体积减少，总症状评分改善 50% 或更多[2]。

激酶试验：使用 Sf21 细胞和杆状病毒载体表达重组蛋白，并通过亲和层析纯化。 JAK 激酶测定使用肽底物 (-EQEDEPEGDYFEWLE) 进行均相时间分辨荧光测定。每个酶反应均使用 Ruxolitinib 或对照、JAK 酶、500 nM 肽、三磷酸腺苷 (ATP；1 mM) 和 2% 二甲基亚砜 (DMSO) 进行 1 小时。 50%抑制浓度(IC50)计算为抑制50%荧光信号所需的INCB018424浓度。

细胞试验：将细胞以 2×103/孔接种于白底 96 孔板，用来自 DMSO 库存的 Ruxolitinib (INCB018424)（0.2% 最终 DMSO 浓度）处理，并在 37°C、5% CO2 下孵育 48 小时。使用 Cell-Titer Glo 荧光素酶试剂或活细胞计数通过细胞 ATP 测定来测量活力。将值转换为相对于媒介物对照的抑制百分比，并使用 PRISM GraphPad 根据数据的非线性回归分析拟合 IC50 曲线。

动物体内实验:给小鼠喂食标准啮齿动物饲料并随意提供水。将 Ba/F3-JAK2V617F 细胞（每只小鼠 105 个）静脉接种到 6 至 8 周龄的雌性 BALB/c 小鼠中。每天监测存活情况，垂死的小鼠被人道处死并在死亡时被视为死亡。在细胞接种后 24 小时内开始使用媒介物（5% 二甲基乙酰胺、0.5% 甲基纤维素）或 Ruxolitinib (INCB018424) 进行治疗，每天两次，通过口服管饲法。使用Bayer Advia120 分析测量血液学参数，并使用Dunnett 检验确定统计显着性。

 参考详情：www.medchemexpress.cn/Ruxolitinib.html

参考文献：

[1]. Quintas-Cardama A, et al. Preclinical characterization of the selective JAK1/2 inhibitor INCB018424: therapeutic implications for the treatment of myeloproliferative neoplasms. Blood, 2010, 115(15), 3109-3117.

[2]. Verstovsek S, et al. A double-blind, placebo-controlled trial of ruxolitinib for myelofibrosis. N Engl J Med, 2012, 366(9), 799-807.

[3]. Tavallai M, et al. Rationally Repurposing Ruxolitinib (Jakafi (®)) as a Solid Tumor Therapeutic.Front Oncol. 2016 Jun 13;6:142.