Infigratinib (BGJ-398； NVP-BGJ398) 是一种有效的 FGFR 家族抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

CAS：872511-34-7

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Infigratinib (BGJ-398; NVP-BGJ398) 是一种有效的 FGFR 家族抑制剂，IC50 分别为 0.9 nM、1.4 nM、 FGFR1、FGFR2、FGFR3 和 FGFR4 分别为 1 nM 和 60 nM。 IC50 和目标：IC50：0.9 nM (FGFR1)、1.4 nM (FGFR2)、1 nM (FGFR3)、60 nM (FGFR4)[1]  

体外：Infigratinib (BGJ-398) 抑制 FGFR1、FGFR2 和 FGFR3，IC50=~1 nM，FGFR3K650E，IC50=4.9 nM和 FGFR4，IC50=60 nM。所有其他激酶的 IC50 值都在 μM 范围内（FYN、LCK、YES 和 ABL，IC50 分别为 1.9、2.5、1.1 和 2.3 μM ) 除了 VEGFR2、KIT 和 LYN，它们在亚微摩尔浓度下受到抑制（IC50=0.18、0.75 和 0.3 μM，分别）。
Infigratinib (BGJ-398) 抑制FGFR1、FGFR2 和 FGFR3 依赖性 BaF3 细胞的增殖，其 IC50 值在低纳摩尔范围内，与在酶促测定中观察到的受体激酶活性抑制相当.
对于其余细胞，除 VEGFR2（IC50 1449 和 938 nM）外，所有 IC50 值均大于 1.5 μM，其中有选择性至少是 FGFR1、FGFR2 和 FGFR3[1] 的 400 倍。
Infigratinib (BGJ-398)（范围在 1 nM 和 10 μM 之间）可有效抑制细胞生长FGFR2突变的子宫内膜癌细胞[2]。

体内：Infigratinib (BGJ-398) 用于皮下植入 RT112/luc1 肿瘤的无胸腺裸鼠：在 NMP/PEG200（1:9，v/v）中作为 5 mg/kg 静脉推注，或通过强饲法作为混悬液口服PEG300/D5W (2:1, v/v) 在 20 mg/kg 剂量下。相关药代动力学 (PK) 参数表明 Infigratinib (BGJ-398) 在本研究中的口服生物利用度为 32%。静脉内给药后，Infigratinib (BGJ-398) 显示出从血管室快速分布到外周组织，转化为高分布容积 (26 L/kg)。血浆清除率高达 3.3 L/h/kg（肝血流量的 61%）。根据 AUC 确定口服给药后肿瘤与血浆的比率为 10[1]。
Infigratinib (BGJ-398) (30 mg/kg) 显着抑制 < 的生长i>FGFR2突变的子宫内膜癌异种移植模型[2]。

激酶试验：在放射性标记 ATP 存在的情况下，通过测量纯化的 GST 融合 FGFR3-K650E 激酶结构域对合成底物的磷酸化来评估酶促激酶活性。通过将 10 μL 3 倍浓缩的 NVP-BGJ398 溶液或对照与 10 μL 相应底物混合物（肽底物、ATP 和 [γ33P]ATP）混合来测量酶活性。通过添加 10 μL 3 倍浓缩的酶溶液（在测定缓冲液中）来启动反应。测定组分的最终浓度如下：10 ng GST-FGFR3-K650E、20 mM Tris-HCl、pH 7.5、3 mM MnCl2、3 mM MgCl2、1 mM DTT、250 μg/mL PEG 20000、2 μg /mL 聚 (EY) 4:1、1% DMSO 和 0.5 μM ATP (γ-[33P]-ATP 0.1 μCi)。根据过滤结合 (FB) 方法，在 96 孔板中在室温下进行 10 分钟，最终体积为 30 μL，包括上述组分。通过添加 20 μL 125 mM EDTA 来终止酶反应，并按如下方式对 33P 掺入多肽底物进行定量：将 30 μL 停止的反应混合物转移至预先用 125 mM EDTA 浸泡 5 分钟的 Immobilon-PVDF 膜上。甲醇，用水冲洗，用 0.5% H3PO4 浸泡 5 分钟，然后安装在断开真空源的真空歧管上。点样后，连接真空，并用 0.5% H3PO4 (200 μL) 冲洗每个孔。取出游离膜并在摇床上用 1% H3PO4 洗涤四次，并用乙醇洗涤一次。将膜干燥并覆盖每孔 10 μL 的闪烁液。最终将板密封并在微板闪烁计数器中计数。 IC50 值通过 NVP-BGJ398 抑制百分比的线性回归分析来计算[1]。

细胞试验：鼠 BaF3 细胞系在补充有 10% FBS、4.5 g/L 葡萄糖、1.5 g/L 碳酸氢钠和 Pen/Strep 的 RPMI-1640 培养基中培养。细胞每周传代两次。使用荧光素酶生物发光测定评估化合物介导的 BaF3 细胞增殖和活力的抑制。使用 μFill 液体分配器将指数生长的 BaF3 或 BaF3 Tel-TK 细胞以 50 μL/孔接种到 384 孔板（4250 个细胞/孔）中。 Infigratinib (BGJ-398) 在 DMSO 中连续稀释并排列在聚丙烯 384 孔板中。然后使用 pintool 转移装置将 50 nL 化合物转移至含有细胞的板中，并将板在 37°C (5% CO2) 下孵育 48 小时。然后添加 25 μL Bright-Glo，并使用 Analyst-GT 定量发光。使用定制曲线拟合软件来生成细胞活力百分比与抑制剂浓度对数函数的逻辑拟合。 IC50 值确定为将细胞活力降低至 DMSO 对照的 50% 所需的化合物浓度[1]。

动物体内实验:小鼠[1]雌性HsdNpa：使用无胸腺裸鼠。 Infigratinib (BGJ-398) 被配制为 PEG300/D5W（2:1，v/v）中的悬浮液，并以 10 和 30 mg/kg/qd 的剂量连续 12 天口服给药。通过方差分析和事后 Dunnett 检验对肿瘤和体重数据进行分析，以比较治疗组与对照组。事后 Tukey 检验用于组内比较。使用GraphPad prism 4.02进行统计分析。作为功效的衡量标准，计算 T/C (%) 值。大鼠[1] 使用6-9周龄的雌性裸Rowett大鼠。 Infigratinib (BGJ-398) 配制为乙酸-乙酸盐缓冲液 pH 4.6/PEG300（1:1，v/v）中的溶液，每天通过管饲法施用于荷瘤大鼠（n=8），连续 20 天剂量为 5、10 和 15 mg/kg/qd（游离碱当量）。应用体积为5mL/kg。用卡尺测量肿瘤体积并根据公式确定：长×宽×高×π/6。抗肿瘤活性表示为T/C(％)：(治疗动物肿瘤体积平均变化/对照动物肿瘤体积平均变化)×100。计算回归(%)。

 参考详情：www.medchemexpress.com/NVP-BGJ398.html

参考文献：

[1]. Guagnano V, et al. Discovery of 3-(2,6-Dichloro-3,5-dimethoxy-phenyl)-1-{6-[4-(4-ethyl-piperazin-1-yl)-phenylamino]-pyrimidin-4-yl}-1-me thyl-urea (NVP-BGJ398), A Potent and Selective Inhibitor of the Fibroblast Growth Factor Receptor Family of Receptor T

[2]. Konecny GE, et al. Activity of the fibroblast growth factor receptor inhibitors dovitinib (TKI258) and NVP-BGJ398 in human endometrial cancer cells. Mol Cancer Ther. 2013 May;12(5):632-42.

[3]. Liu H, et al. Identifying and Targeting Sporadic Oncogenic Genetic Aberrations in Mouse Models of Triple Negative Breast Cancer. Cancer Discov. 2018 Mar;8(3):354-369.