Bestatin 是一种天然的、广谱的、竞争性的 CD13（氨肽酶 N）/APN 和 白三烯 A4 水解酶 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

中文名：乌苯美司

CAS：58970-76-6

品牌：MedChemExpress (MCE)

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生物活性：Bestatin 是一种天然的、广谱的、竞争性的 CD13（氨肽酶 N）/APN 和 白三烯 A4 水解酶 抑制剂。 Bestatin 具有抗癌作用[1][2]。 

体外：在 ATRA 敏感的 APL NB4 细胞中，Bestatin 增强 ATRA 诱导的分化并抑制 ATRA 驱动的 p38 MAPK 磷酸化。 Bestatin 不能逆转 ATRA 抗性 APL MR2 细胞中的分化阻滞。 CD13 与抗 CD13 抗体 WM-15 连接导致 p38 MAPK 磷酸化，降低 Bestatin 对 p38 MAPK 磷酸化的抑制作用，并完全消除 Bestatin 对 NB4 细胞 ATRA 诱导分化的增强[2] 。由于细胞生长速率和细胞分裂频率降低，Bestatin (600 μM) 处理的细胞在细胞周期中进展较慢。 Bestatin 抑制 D. discoideum 中的有丝分裂频率和固有的多核性，并且在 0-600 μM 时对 D. discoideum 细胞没有细胞毒性。 Bestatin 抑制 PsaA-GFP 和 GFP 表达细胞裂解物中的氨肽酶活性，抑制率分别为对照的 69.39% 和 39.93%[4]。

体内：Bestatin (20 μM) 显着降低糖尿病小鼠中的 CD13 表达，与糖尿病载体治疗的小鼠相比，显着抑制 MMP-9 特异性凝胶分解条带密度。 Bestatin 治疗显着抑制糖尿病小鼠中 VEGF 和乙酰肝素酶的表达。玻璃体内贝他汀治疗显着下调糖尿病小鼠视网膜中 HIF-1α 和 VEGF 的表达。此外，玻璃体内贝他汀治疗显着抑制了糖尿病小鼠视网膜中乙酰肝素酶的上调表达[1]。 Bestatin（10、1 和 0.1 毫克/千克，腹腔注射）在对 SRBC 的抗原增强体液反应之前进行处理会导致产生溶血性抗 SRBC 抗体 (PFC) 和 2-ME 抗性血清血凝素滴度的脾细胞数量增加（剂量为 0.1 mg/kg）。 Bestatin（1 和 0.1 mg/kg）在环磷酰胺注射后隔天对小鼠给药 5 次，不改变药物对 PFC 数量的抑制作用，甚至导致剂量下总抗 SRBC 血凝素的进一步降低抗原刺激后第 7 天为 1 mg/kg[3]。

激酶试验：收获细胞、洗涤并在 NP-40 裂解缓冲液（50 mM Tris-HCl [pH 7.5]、150 mM NaCl、0.5% NP-40）中裂解。使用 Bradford 测定法对总细胞蛋白进行定量，并制备 1 mg/mL 的蛋白等分试样。将 10 微升总细胞蛋白与 290 μL 底物溶液（0.1 mg/mL 二硫苏糖醇 [DTT]、0.1 mg/mL 白蛋白和 1 mM 丙氨酸-β-萘酰胺）混合。 15 分钟和 30 分钟后进行荧光测量（340 nm 激发，400 nm 发射）。 15 分钟和 30 分钟测量值之间的直线斜率用于代表氨肽酶活性。在进行荧光氨肽酶测定之前，将总细胞蛋白与 bestatin、amastatin、嘌呤霉素、EDTA 和/或 ZnCl2 预孵育 20 分钟。

细胞试验：将生长中的细胞（1×106 至 2×106 细胞/mL）稀释至 1.0×103 细胞/mL，并转移（3 mL）至 12 孔多孔板（2.5 厘米直径/孔）的孔中。细胞用 0、10、50、100、300 或 600 μM Bestatin 处理，并在 21°C 下以 180 rpm 振荡生长 48 小时。血细胞计数器用于测量 0、24 和 48 小时后的细胞密度。

动物体内实验:将贝斯汀溶解在 PBS 中。在 SRBC 免疫前，将药物（剂量为 10、1 和 0.1 mg/kg）腹膜内注射给未接受环磷酰胺治疗的小鼠，每隔 24 小时注射 5 或 10 次。最后一剂贝他汀后 24 小时对小鼠进行免疫。在SRBC免疫前12天，以350mg/kg的剂量单次腹膜内注射环磷酰胺诱导药理学免疫抑制。在SRBC免疫之前，以1和0.1mg/kg的剂量将Bestatin以1和0.1mg/kg的剂量腹膜内注射给环磷酰胺免疫抑制的小鼠，每48小时间隔5次或每24小时间隔10次。第一剂贝他汀在环磷酰胺后24小时注射，最后一剂药物在SRBC免疫前24小时注射。

 参考详情：www.medchemexpress.cn/Bestatin.html

参考文献：

[1]. Hossain A, et al. Protective effects of bestatin in the retina of streptozotocin-induced diabetic mice. Exp Eye Res. 2016 Aug;149:100-6

[2]. Qian X, et al. Inhibition of p38 MAPK Phosphorylation Is Critical for Bestatin to Enhance ATRA-Induced Cell Differentiation in Acute Promyelocytic Leukemia NB4 Cells. Am J Ther. 2016 May-Jun;23(3):e680-9.

[3]. Lis M, et al. The effects of bestatin on humoral response to sheep erythrocytes in non-treated and cyclophosphamide-immunocompromised mice. Immunopharmacol Immunotoxicol. 2013 Feb;35(1):133-8

[4]. Poloz Y, et al. Bestatin inhibits cell growth, cell division, and spore cell differentiation in Dictyostelium discoideum. Eukaryot Cell. 2012 Apr;11(4):545-57