nature级别图表:一个注释气泡热图函数(适用于单细胞及普通数据)

之前我们写过一个函数,主要是展示单细胞比例图(nature级别图表:单细胞转录组细胞比例统计可视化函数),很多小伙伴购买函数,在使用过程却出现问题,主要的原因是我们在帖子里写的不够清楚,小伙伴也没有理解代码的意思,鉴于一个一个解释太费时间,我们决定写函数的帖子一律录制视频解说(视频在B站,搜索:KS科研分享与服务),方便大家使用。所以,本次函数的使用我们已经制作好视频了,B站链接: 气泡热图注释函数_哔哩哔哩_bilibili需要购买函数的小伙伴可添加作者微信联系。微信VIP群已提前发布过,没有看到的小伙伴可查看记录。QQ群成员还是半价。

正式内容

我们写了一个作图函数Dotplot_anno()。首先写的初衷是为了展示单细胞marker基因,并对基因进行注释。但是后来我们将这个函数的功能扩大了,不仅仅使用在单细胞中,而且可以使用在普通基因表达气泡热图或者方块热图的使用上,并对需要的基因进行注释。或者在多组富集气泡图展示上,并对通路绘制相关的注释。而且,对legend给加上了边框。理解函数内容,学习更多。

函数的相关参数在开头已经进行详细了的注释。接下来就使用下看看效果!这个函数输入的数据单细胞是seurat对象,其他的数据则是ggplot可识别的长数据,如果是宽数据需要自己转化,对照我们的示例数据。

image.png

1、单细胞marker基因展示

首先我们运行单细胞数据看看效果:这里的features基因的顺序可以自定义,至于基因的分组要和group结合一致。


library(Seurat)
library(ggplot2)
library(dittoSeq)
library(viridis)
setwd('D:/KS项目/公众号文章/seurat中Dotplot注释函数')
source('./Dotplot_anno.R')
#单细胞的效果
DefaultAssay(uterus) <- "RNA"
markers <- c("ACTA2", "RGS5", #smooth muscle cells---7, 16
             "MS4A6A", "CD68","LYZ",#macrophages---13
             "CCL5", "STK17B","PTPRC",#lymphocytes---0,3,4,5,6,14,15,17,23,18,19
             "DCN", "COL6A3", "LUM",#stromal fibroblasts---2,20
             "PECAM1","PCDH17", "VWF",#endothelial cells---8,11,22
             "EPCAM", "CDH1",#(unciliated)epithelial cells---1,9,21
             "FOXJ1","CDHR3","DYDC2")#(ciliated)epithelial cells---10,12

Dotplot_anno(uterus, features = markers, celltype_color = dittoColors(),
             group = c(rep('SMC',2), rep('MAC',3),rep('Ly',3),
                       rep('SF',3), rep('EC',3),rep("UEC",2), rep('CEC',3)),
             color = colorRampPalette(c("navy","white","firebrick3"))(100),
             order = T)

image.png

2、基因表达热图 接下来看看bulk的效果,对于bulk表达数据,bulk基因表达量那一列列名要修改命名成exp,对于非单细胞的数据, 首先要进行设置的一个参数就是single_type=F,表明我们的对象不是单细胞对象。

df <- read.csv('Bulk.csv', header = T)
df$exp <- log10(df$exp)
#气泡图效果
Dotplot_anno(df, single_type = F, group = c(rep('inflammation',7),
                                            rep("chemotaxis",6),
                                            rep("cytotoxicity",5)),
             celltype_color = dittoColors(), 
             color = colorRampPalette(c("navy","white","firebrick3"))(100),
             order = F,heatmap = F,
             bulk_feature = 'features.plot',
             bulk_samples = 'id')

image.png

#热图效果
Dotplot_anno(df, single_type = F, group = c(rep('inflammation',7),
                                            rep("chemotaxis",6),
                                            rep("cytotoxicity",5)),
             celltype_color = dittoColors(), 
             color = colorRampPalette(c("navy","white","firebrick3"))(100),
             order = F,heatmap = T,
             bulk_feature = 'features.plot',
             bulk_samples = 'id')

image.png

3、富集气泡图

富集分析则是需要将log(P)那一列列名修改为exp,而且gene ratio那一列的列名必须修改为ratio。当然,首先要进行设置的一个参数就是single_type=F。


#看一下富集效果
df2 <- read.csv('df_enrich.csv',header = T)
df2$exp <- -log10(df2$exp)
Dotplot_anno(df2, single_type = F, group = c(rep('immune',5),
                                            rep("Metabolism",5),
                                            rep("stress",5),
                                            rep("antigen",5)),
             celltype_color = dittoColors(), 
             color = viridis(256),
             order = F,
             bulk_feature = 'features.plot',
             bulk_samples = 'id',)

image.png

修改下顺序,效果会好点。


#自定义顺序
Dotplot_anno(df2, single_type = F, group = c(rep('immune',5),
                                             rep("Metabolism",5),
                                             rep("stress",5),
                                             rep("antigen",5)),
             celltype_color = dittoColors(), 
             color = viridis(256),
             order = T,
             bulk_feature = 'features.plot',
             bulk_samples = 'id', level=c('NK',"CD14+ Mono","DC","FCGR3A+ Mono"))

image.png

这就是这个函数的作用了,使用起来还是可以的,希望对您的学习有用。如果觉得分享有用点个赞再走呗!

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使用 GDALDataset::RasterIO 函数来降低栅格数据集的分辨率,可以通过设置读取和写入的像素数来实现。假设原始数据集的分辨率为 $w_0 \times h_0$,要将其降低到 $w_1 \times h_1$,可以先计算出每个像素的宽度和高度比例: ```c++ double scaleX = (double)w_0 / w_1; double scaleY = (double)h_0 / h_1; ``` 然后,可以创建一个大小为 $w_1 \times h_1$ 的缓冲区,将原始数据集中的数据按比例写入到缓冲区中: ```c++ // 打开原始数据集 GDALDataset *pSrcDS = (GDALDataset *) GDALOpen("path/to/src/dataset", GA_ReadOnly); // 创建输出数据集 GDALDriver *pDriver = GetGDALDriverManager()->GetDriverByName("GTiff"); GDALDataset *pDstDS = pDriver->Create("path/to/dst/dataset", w_1, h_1, pSrcDS->GetRasterCount(), GDT_Float32, NULL); // 计算每个像素的宽度和高度比例 double scaleX = (double)w_0 / w_1; double scaleY = (double)h_0 / h_1; // 设置读取和写入的像素数 int nXSize = (int) ceil(scaleX); // 保证至少读取一个像素 int nYSize = (int) ceil(scaleY); // 创建缓冲区 float *pBuf = (float *) CPLMalloc(nXSize * nYSize * sizeof(float)); // 逐行读取原始数据集的数据,并按比例写入到缓冲区中 for (int y = 0; y < h_1; y++) { for (int x = 0; x < w_1; x++) { // 计算在原始数据集中的位置 int srcX = (int) (x * scaleX); int srcY = (int) (y * scaleY); // 读取数据 CPLErr err = pSrcDS->RasterIO(GF_Read, srcX, srcY, nXSize, nYSize, pBuf, nXSize, nYSize, GDT_Float32, pSrcDS->GetRasterCount(), NULL, 0, 0, 0); if (err != CE_None) { // 处理错误 // ... } // 计算平均值 float sum = 0; for (int i = 0; i < nXSize * nYSize; i++) { sum += pBuf[i]; } float avg = sum / (nXSize * nYSize); // 写入数据 err = pDstDS->RasterIO(GF_Write, x, y, 1, 1, &avg, 1, 1, GDT_Float32, pSrcDS->GetRasterCount(), NULL, 0, 0, 0); if (err != CE_None) { // 处理错误 // ... } } } // 释放缓冲区 CPLFree(pBuf); // 关闭数据集 GDALClose(pSrcDS); GDALClose(pDstDS); ``` 在上述代码中,我们首先打开原始数据集,然后创建大小为 $w_1 \times h_1$ 的输出数据集。接下来,我们计算出每个像素的宽度和高度比例,并根据比例设置读取和写入的像素数。然后,我们创建一个大小为 $nXSize \times nYSize$ 的缓冲区,逐行读取原始数据集的数据,并按比例写入到缓冲区中。对于每个输出像素,我们计算出其对应的原始像素的平均值,并将其写入到输出数据集中。最后,我们释放缓冲区,并关闭数据集。 需要注意的是,上述代码仅适用于单波段数据集,如果处理多波段数据集,则需要在读取和写入数据时指定要处理的波段。同时,如果原始数据集的分辨率不能整除目标分辨率,则需要对每个输出像素进行加权平均,权重为其覆盖的原始像素的面积。

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