ctab法提取dna流程图_【分子】DNA的提取与检测（下）——质粒DNA

文章来自GongZH：[植为一生]

【分子】DNA的提取与检测（下）——质粒DNA​mp.weixin.qq.com

爱米娜桑，大家好我们的分子生物学实验又回来聊。我们继续DNA的提取故事，就很舒服。今天我们来看质粒这个小宝宝，爱，就是它~~~

三、碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA

【实验原理】

碱裂解法提取质粒是利用共价闭合环状质粒DNA（cccDNA）与基因组DNA在拓扑结构上的差异性将其分离的过程。

当pH=12.0-12.5时，线状DNA变性，此时cccDNA氢键虽然打开，但两条互补链仍然彼此结合。

当加入pH=4.8的醋酸钾高盐缓冲液使体系pH降低后，cccDNA复性，而基因组DNA不能迅速准确复性。

通过离心，使基因组DNA、蛋白质-SDS复合物、大分子RNA等共沉淀，而质粒DNA仍然留在上清液中。

【实验试剂】