DNA的提取问题
问:经过近一个周的努力,终于提取出了像样的DNA,不过还不是十分满意,但已经能独立进行实验了,不用再“见人就抓,抓住就问”了,呵呵!记得曾经抓过黄清师兄、梁伟锋师兄、康云师兄、王宝生师兄、杨霞师姐、冬梅、艳艳等,还有一位不知道名字的师兄,当然老公是必定要抓地,嘿嘿!真心感谢他们对我的耐心指导和帮助!没有他们的出手相助,我真的心里没底。邱志敬提DNA提的挺好的,向他学习!
同时,丁香园上不知名的朋友给了我很多的实验技巧,现摘录如下以作学习之用:
我现在所提取的植物基因组DNA均为黄褐色沉淀,参考了一些文献将实验条件做了相应修改,但结果不理想,请问有什么有效的方法可以解决此问题吗?多谢!
答:DNA经离心后沉积在离心管底部时会有一些颜色,大概是很浅的黄褐色,如果蛋白没有抽提干净,就会呈现出白色,所以我觉得你先跑个胶试试,我觉得没有什么问题。
问:谢谢,我提的DNA沉淀颜色较深,有点接近于棕褐色,最后溶解于TE后颜色也很深,不象他们提取的呈透明状,跑琼脂糖凝胶电泳可看到在20kb出有一透亮条带,如果去除这些杂质后不知DNA的量是否会多一点?
答:棕褐色应该是由于多酚类物质氧化所致--可考虑在提取液中添加抗氧化剂和PVP来控制,但对你的DNA量不会有什么影响.多酚类的存在可能会影响你的DNA的限制性酶切效果.
在提取某些植物DNA时总是遇到多糖成分的干扰,尝试了几种方法效果一直不大理想,DNA质量一直不高,哪位高人指点一下如何消除多糖的影响?
不知楼主用的什么方法提取,是SDS法还是CTAB法。一般来说&#