ctab提取dna流程图_核酸提取、纯化与常见问题解答

写在前面

核酸提取包括DNA提取，RNA提取，质粒提取。核酸是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础，是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究，首先都需要对核酸进行提取和纯化。

核酸是生命的最基本物质之一，可分为DNA和RNA两类，广泛存在于动物、植物细胞、微生物等所有生命体内。不仅起着储存和传递遗传信息的作用，而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置，因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。

核酸提取包括DNA提取，RNA提取，质粒提取。核酸是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础，是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究，首先都需要对核酸进行提取和纯化。

核酸提取仪

是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器，核酸提取仪分为两类：一类是大型的自动化的，一般称为自动液体工作站；另一类是小型自动核酸提取仪，利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。

大型自动液体工作站因为设备成本高昂，运行成本高，适合一次提取几千个同一种类标本，所以真正得到应用的比较少；而小型自动化的仪器，因为仪器设备和运行成本低，操作方便得到越来越多的应用。

核酸提取纯化方法

自1869年核酸被首次发现以来，许多研究者在核酸的提取方法上进行了不懈的探索，对核酸的各种材料和试剂进行了改进，十二烷基磺酸钠、酚、脲和胍盐等各种试剂纷纷被应用到核酸提取实验中，各种用于核酸提取的商品化试剂盒也应运而生。

其中，传统的提取方法主要有：酚抽提法、碱裂解法、CTAB抽提法和EtBr-CsCl梯度离心法。这些传统提取方法可从不同组织样本中分离出DNA和RNA，但这些技术中包含沉淀和离心等操作步骤，其所需的生物样本量较大，且提取的步骤较为繁杂、费时费力，得率也不高，难以实现自动化操作。

另外，大部分的传统方法中还需要用到有毒化学试剂，对操作人员的健康具有潜在危害，因此，伴随着分子生物学以及高分子材料学的发展，从液相系统中分离核酸的传统技术逐渐被以固相载体为基础的新方法所取代。

固相载体吸附法：

以固相吸附物载体为基础的新型核酸提取方法主要有：旋转离心柱提取法、玻璃珠吸附法、二氧化硅基质法、阴离子交换法和纳米磁珠提取法。这类方法的操作步骤主要可分为三个部分：

(1)利用裂解液促使细胞破裂，使核酸释放于液相中

(2)利用载体对核酸的较强亲和力和吸附力&#x