【方法篇】S-棕榈酰化蛋白修饰质谱鉴定方法

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S-脂酰化是长链脂肪酸主要是棕榈酸酯（C16:0, S-棕榈酰化）通过与蛋白质上的硫酯连接与半胱氨酸（Cys）残基共价链接。此可逆的翻译后修饰在真核生物中调节蛋白定位，哺乳动物生理学过程以及人类疾病。

此处文章主要简单介绍了脂肪酸化学标记物与羟胺介导的S-脂酰化蛋白富集的整合和优化，以及直接标记修饰过的Cys残基以定位蛋白上脂质修饰位点。与以前方法相比较起来改进了富集的方法，此方法能够对许多蛋白质S-酰基化位点直接鉴定。

蛋白的主要酰化作用包括S-脂酰化，N-豆蔻酰化，O-脂酰化等，它们在脂肪酸链长度和修饰的氨基酸位点不同。许多研究揭示了脂酰化蛋白的多样性和数量，并强调了这些脂质修饰蛋白在生理和疾病中的潜在功能和调控机制。尽管如此，精确定位蛋白质半胱氨酸残基上的S-脂酰化位点和内生性附着脂质仍然是具有挑战性的工作。

图1

S-棕榈酰化的主要功能是促进蛋白质与细胞膜的结合。蛋白质可以由一个棕榈酰基组成，也可以与更多棕榈基或与其他脂质，如豆蔻酰基。

由于对S-棕榈酰化蛋白分析仍然具有挑战性，由于S-棕榈酰化修饰蛋白亚水平以及疏水性和潜在不稳定的硫代质链的S-脂酰化肽。现在常用的几种方法可以捕获S-脂酰化蛋白以及对目标修饰蛋白进行捕获（