一键分析ChIP-seq数据

ChIP-seq是一种结合位点分析法,用于研究体内蛋白质与DNA相互作用。通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)与第二代测序技术相结合,在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区域。

实验过程

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流程简介

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  1. 1. fastp:原始数据质控,将 Raw data 转换成 Clean data。

  2. 2. bowtie2:将经过质控的 Clean data 比对到参考基因组上,得到比对文件(BAM格式)。

  3. 3. picard:去除 BAM 文件中的 PCR 重复。

  4. 4. macs2:检出 ChIP-seq 峰。

  5. 5. MultiQC:汇总 fastp,bowtie2 以及 macs2 的统计结果。

运行流程

进入网站

https://usegalaxy.cn

找到流程

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参数设置

本流程支持 ChIP-seq 双端测序、有对照样本的数据分析,需要设置的参数如下图所示:

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需要注意的是有效基因组大小,指的是基因组可比对(mappable)区域的大小。可以参照如下网站:

https://deeptools.readthedocs.io/en/develop/content/feature/effectiveGenomeSize.html

该网站上计算好了常见基因组的有效大小,也可以利用其介绍的工具自行计算。

输出结果

fastp 输出:

  • • 质控结果 HTML (对照)

  • • 质控结果 HTML (实验)

bowtie2 输出:

  • • 比对统计(对照)

  • • 比对统计(实验)

picard 输出:

  • • 去重后的 BAM (对照)

  • • 去重后的 BAM (实验)

macs2 输出:

  • • 峰值文件(Narrow Peaks)

MultiQC 输出:

  • • 统计结果汇总 HTML(来源于 fastp,bowtie2,macs2)

注意事项

本流程采用 bowtie2 作为比对工具,目前 Galaxy 平台上构建了常见物种基因组的 bowtie2 索引文件,如果您需要的基因组索引不存在,欢迎联系我们添加。


一键分析10X单细胞数据点击图片跳转

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一键分析Bulk转录组数据点击图片跳转

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