AbMole|FAM3A 在腹主动脉瘤中的作用机制研究

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腹主动脉瘤（Abdominal Aortic Aneurysm，AAA）是一种严重威胁人类健康的疾病，其形成和进展的病因及病理生理机制尚不清楚。近年来，血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cell，VSMC）的重编程在腹主动脉瘤的发生发展中被认为起到了关键作用。然而，相关的调节因子和机制仍有待阐明。

近期，一项发表在《Nature Communications》上的研究论文《FAM3A reshapes VSMC fate specification in abdominal aortic aneurysm by regulating KLF4 ubiquitination》为我们揭示了 FAM3A 在腹主动脉瘤中的重要作用.

该研究中使用了AbMole的MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator（M19992）产品。

研究人员首先通过 HE 染色、Masson 染色、免疫荧光染色、western blot 和 qRT-PCR 等实验，对 AAA 患者和小鼠模型进行了检测。结果发现，AAA 患者和小鼠模型的主动脉和血浆中 FAM3A 表达降低。进一步的研究表明，FAM3A 主要存在于小鼠主动脉中膜的平滑肌细胞中。这一结果提示 FAM3A 可能在腹主动脉瘤的发生发展中起到了一定的作用。    

图1：AAA 患者和小鼠模型中动脉中的 FAM3A 蛋白水平降低。    

为了深入了解 FAM3A 在腹主动脉瘤微环境中的作用，研究人员利用单细胞 RNA 转录测序数据进行了分析。结果显示，FAM3A 在 AAA 组织中的总体 mRNA 水平降低，且在 VSMC、内皮细胞和成纤维细胞中的 mRNA 和蛋白水平显著降低。这表明 FAM3A 在腹主动脉瘤微环境中的表达具有细胞特异性，其在不同细胞类型中的表达变化可能与腹主动脉瘤的发生发展密切相关。

为了验证 FAM3A 在腹主动脉瘤中的作用，研究人员构建了 FAM3A 腺病毒过表达小鼠模型。结果发现，FAM3A 过表达可显著减小动脉瘤直径，提高生存率。进一步的分析表明，FAM3A 过表达降低了炎症细胞浸润、炎症因子水平和 MMP2、MMP9 的表达，恢复了 VSMC 收缩表型标记物的表达，但不显著改变 KLF4 的转录水平。这一结果表明，FAM3A 过表达可以改善小鼠 AAA 模型的病理结局，其作用机制可能与抑制炎症反应、降低 MMP2 和 MMP9 的表达以及恢复 VSMC 收缩表型有关。    

图2：FAM3A 在 AngII-ApoE 中的过表达−/−小鼠 AAA 模型减弱病理结果。

为了进一步验证 FAM3A 在腹主动脉瘤中的作用，研究人员给小鼠注射了重组 FAM3A 蛋白。结果发现，补充重组 FAM3A 可显著减小主动脉直径，提高生存率，降低炎症因子水平和 MMP2、MMP9 的表达，恢复 VSMC 收缩表型。这一结果与 FAM3A 过表达小鼠模型的结果一致，进一步证实了 FAM3A 在腹主动脉瘤中的重要作用。    

图3：在 AngII-ApoE 中补充重组 FAM3A 蛋白−/−小鼠 AAA 模型改善病理结果。

研究人员通过 western blot、流式细胞术和免疫荧光共定位实验，探究了 FAM3A 对 VSMC 向其他中间细胞转分化的影响。结果发现，FAM3A 过表达或补充重组 FAM3A 可抑制 VSMC 向巨噬细胞、软骨细胞、成骨细胞、间充质细胞和成纤维细胞等中间细胞类型的转分化，并促进其向脂肪细胞样中间物的转化。这一结果表明，FAM3A 可以调节 VSMC 的命运决定，抑制其向有害的中间细胞类型转分化，从而维持 VSMC 的正常功能。    

图 4：FAM3A 影响 VSMC 向其他中间细胞类型的转分化。

为了探究 FAM3A 作用的分子机制，研究人员对 FAM3A 与 KLF4 的关系进行了研究。通过 western blot、免疫沉淀和共聚焦成像实验，发现 FAM3A 可抑制 KLF4 的产生和核定位，促进 KLF4 的泛素化降解，降低 KLF4 的磷酸化水平。这一结果表明，FAM3A 可能通过调节 KLF4 的翻译后修饰来发挥其在腹主动脉瘤中的作用。    

图 5：FAM3A 抑制 KLF4 的产生和核定位。

最后，研究人员通过 western blot 实验，探究了 VSMC 分化重编程的信号通路。结果发现，FAM3A 可激活 AKT、ERK1/2 和 TGFβ/SMAD3 信号通路。TGFβ/SMAD3 拮抗剂 SIS3 可削弱 FAM3A 对 VSMC 收缩表型的维持作用，促进 VSMC 向其他细胞类型的转分化，逆转 FAM3A 对 KLF4 磷酸化、蛋白量和核定位的抑制作用，以及对 KLF4 泛素化的促进作用。这一结果表明，FAM3A 可能通过激活 TGFβ/SMAD3 信号通路来调节 VSMC 的命运决定，抑制 KLF4 的作用，从而重塑 VSMC 表型。    

综上所述，这项研究揭示了 FAM3A 在腹主动脉瘤中的重要作用。FAM3A 在 AAA 患者和小鼠模型中表达降低，过表达或补充 FAM3A 可减轻 AAA 的形成。FAM3A 可抑制 VSMC 向其他中间细胞类型的转分化，维持 VSMC 的收缩表型。FAM3A 可通过激活 TGFβ 信号通路，抑制 KLF4 的作用，从而重塑 VSMC 表型。这一研究为基于 FAM3A 恢复 AAA 中 VSMC 稳态的治疗策略的开发提供了新的视角。然而，这项研究仍存在一些局限性和未知问题，例如 FAM3A 在腹主动脉瘤中的具体作用机制还需要进一步深入研究，FAM3A 作为治疗腹主动脉瘤的潜在药物还需要进行更多的临床前和临床研究。相信在未来的研究中，我们将对 FAM3A 在腹主动脉瘤中的作用有更深入的了解，为腹主动脉瘤的治疗提供更有效的策略。