纳米脂质颗粒LNP配方常用的结构脂质：胆固醇

经典的LNP的脂质成分通常包括四种：可电离脂质(或阳离子脂质)、辅助脂质，胆固醇，聚乙二醇化脂质(PEG-脂质)。之前介绍了阳离子脂质(CLs)和可电离脂质(ILs)，今天我们一起来了解常用的结构脂质：胆固醇。

胆固醇是一种天然丰富的细胞膜成分，常作为LNP配方的结构脂质。LNP配方中胆固醇占比约20−50%。胆固醇是动物细胞膜的丰富成分，通常从羊毛等天然原料中大量提取。胆固醇在细胞摄取中的作用很长一段时间一直被忽视。研究发现，用天然植物甾醇(如β-谷甾醇和氧化胆固醇衍生物)取代LNP配方中的胆固醇，可以显著改善mRNA的递送，可能由于内吞途径中不同的脂质运输和LNP内体逃逸的增强的结果。虽然目前还不完全清楚为什么含有β-谷甾醇的LNP更有可能逃脱溶酶体途径，但它们的形状多态性和多层结构组织可能会使内体膜变形或延长核酸释放的时间框架。胆固醇主要存在于LNP的外壳，这解释了为什么对固醇结构进行修饰可能会引起LNP表面的组织变化。

此外，最近的研究表明，当接触载脂蛋白E(ApoE)时，胆固醇会从LNP核心转移到脂质外壳上。这些结果表明，与可电离脂质相比，虽然胆固醇相对惰性，但胆固醇及其衍生物可能影响细胞识别途径。然而，关于LNP配方中胆固醇的修饰，仍然存在许多未知和挑战。例如，植物甾醇没有胆固醇那么丰富，供应稀少，生产成本高，可能会阻碍它们在LNP配方中的应用；原料的性质和相应的痕量杂质可能会导致LNP的批次差异性。固醇和脂质的立体化学也可能对LNP配方产生潜在影响，如立体化学是否会影响脂质的识别、运输和循环利用? 不同对映体在LNP表面的脂质堆积是否有显著差异? 这些问题的答案需要进一步的研究探索。