星状纳米金IgG-Au-HRP-p53标记盐酸克伦特罗单克隆抗体/兔抗的制备过程

星状纳米金IgG-Au-HRP-p53标记盐酸克伦特罗单克隆抗体/兔抗的制备过程

纳米金(Nanogold)是指金粒子直径在1~100 nm之间的金材体，今天小编分享星状纳米金IgG-Au-HRP-p53标记抗体，一起看看吧：

纳米金标记P53制备过程:

取浓度为0.59× 107 mol/L的10 nm 纳米金溶液1 ml,加入0.2 mol/L的K,CO;调至 pH 为9.0左右;加入HRP与抗体体积比为10:1，浓度均为l mg/ml 的混合液66 ul，室温孵育1 h;加入10%( w/v)聚乙二醇(PEG)8 000 50 ul稳定和钝化胶体金;后纳米金探针用纳米金重悬液（0.05 mol/L TrispH 7.8，含1.25%蔗糖，0.2%BSA，0.05% PEG，0.05%PVP，0.15% Tween20）在离心半径为9 cm，9 000 r/min、4 ℃条件下，离心4~5 次，除去未结合的抗体和 HRP，加入400 ul 纳米金重悬液重悬纳米金探针，4 ℃放置备用。

纳米金标记盐酸克伦特罗单克隆抗体制备过程：

移取纳米金溶液0.5 ml.于5 ml.离心管中,用0. 1 mol-L-'氢氧化钠溶液调节至适当的酸度,用黑纸包住避光。在避光条件下,缓慢搅拌.先缓慢滴加适量抗体,搅拌反应l h,再缓慢滴加牛血清白蛋白(BSA)至其质量浓度为5 g . L-',搅拌反应0.5 h,后缓慢滴加聚乙二醇至其质量浓度为l g ·L-',搅拌反应0.5 h。反应后溶液于4℃放置过夜。以12 000 r . min~'转速离心45 min。将制得的金标抗体采用离心法纯化,弃去上层溶液,沉淀重溶于酸度为pH 7且含5 g·L-' BSA和1 g·I聚乙二醇的溶液中,于4℃保存,备用。

生物的蛋白、多肽、核苷酸的结构会受到系统的温度的影响，在1定的温度下，多肽或核苷酸的分子结构会发生变化，导致蛋白的功能损失和核苷酸的分解。因此，可以利用纳米颗粒对温度的敏感分子进行改性，从而适应对温度变化的反应。而纳米金是一种常用的纳米颗粒，可以对纳米金表面修饰，用疏基、胺基等配体可以修饰金纳米粒子，借助配体的官能团参与多种化学反应等。

HRSW RL2023.1