绿色/水溶性荧光标记的透明质酸FITC-Hyaluronate壳聚糖的制备过程

绿色/水溶性荧光标记的透明质酸FITC-Hyaluronate壳聚糖的制备过程

今天小编分享荧光素标记多糖，一起看看吧：

荧光素标记壳聚糖的制备过程：

在10.0 ml含1% Chitosan的0. 1 mol/L乙酸溶液中,加入10.0 ml甲醇,再缓慢加入1定体积的2.0 mg/ ml FTIC甲醇溶液。室温暗处反应3 h后,用0.2mol/L NaOH沉淀标记的产物。沉淀物以10 000 r/min离心15min,用体积比为70:30的甲醇水溶液洗涤。洗涤和离心操作若干次,直至上清液中无荧光检出(入x = 485 rm,入em = 535nm)。标记的产物重新溶于10.0 ml 0.1 mol/L乙酸中,暗处透析3d后,冷冻干燥。

常见的多糖除了壳聚糖，还有透明质酸，HA是一类具有较大分子量的生物多糖。用化学和酶学的方法，发现 HA是由一个由N-乙酰-D-葡萄糖胺（GlcNAc）和葡萄糖醛酸（GlcA）的重复二糖构成的。二糖经β1~3结合后，又结合成 HA链。

异硫氰酸荧光素（FITC）是目前广使用的一种低分子化合物，其最大吸收波长在490-495纳米，最大发射波长在520-530 nm之间，表现出鲜明的黄绿荧光。它具有高的量子效率、长的荧光寿命、良好的光稳定性、低温系数小等优点，广应用于杂交探针、降解蛋白序列和抗体标记。

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