microRNA的分析过程:
microRNA测序数据分析选用软件miRDeep,关于这个软件,有文章:
Discovering microRNAs from deep sequencing data using miRDeep,Nature Biotechnology 26, 407 - 415 (2008)
引用次数:251次
链接:http://www.nature.com/nbt/journal/v26/n4/abs/nbt1394.html
分析流程如下:
第一步 去接头!(如果你的测序数据是等长的,远大于microRNA的长度18~26的话,那肯定没去过接头)
$ mapper.pl
file−d−h−i−j−k
file−d−h−i−j−kadapter -l 18 -m -s $file.collapsed
第二步 回贴 将去过接头的reads回贴回参考基因组
mapper.pl
mapper.plfile.collapsed -c -p
genome−t
genome−tfile.aln
第三步 鉴定miRNA 已知的miRNA或是新的miRNA都会被鉴定出来,而且表达量也会报出
miRDeep2.pl
miRDeep2.plfile.collapsed
genome.fa
genome.fafile.aln
mature.fa
mature.fahomology.mature.fa
pre.fa−t
pre.fa−tspecies.name -c 2>$file.report.log
第四步 如果你有一个miRNA的集合 先跳过第三步直接做定量的话
quantifier.pl−p quantifier.pl−ppre.fa -m mature.fa.−r mature.fa.−rfile.collapsed -U &