4.ArchR的降维-聚类(1)

本文档介绍了使用ArchR和R语言进行scATAC-seq数据的降维和聚类分析,包括LSI、SVD、Seurat的FindClusters函数和UMAP图的生成过程。通过迭代LSI和调整分辨率,尝试将细胞分为30个聚类,但发现特定标记基因(如CD34和CD19)的细胞群在UMAP图上重叠。作者参考文献并调整参数,但未见明显改进,计划后续继续研究。
摘要由CSDN通过智能技术生成

         最近很想从Fragmens文件开始,去复现出greenleaf团队scATAC-seq数据中的那张UMAP图。文中作者质控完得到:35038个单个核细胞。然后进行迭代LSI降维-harmony矫正批次效应-Seurat的FindClusters( )函数进行聚类-addUMAP函数进行线性降维-plotEmbedding()函数绘制二维空间的降维图。

原图呢长这样:

文献来源:Granja JM, Klemm S, McGinnis LM, Kathiria AS, Mezger A, Corces MR, Parks B, Gars E, Liedtke M, Zheng GXY, Chang HY, Majeti R, Greenleaf WJ. Single-cell multiomic analysis identifies regulatory programs in mixed-phenotype acute leukemia. Nat Biotechnol. 2019 Dec;37(12):1458-1465. doi: 10.1038/s41587-019-0332-7. Epub 2019 Dec 2. PMID: 31792411; PMCID: PMC7258684.

4.1 利用LSI获得PeakMatrix矩阵     

先看作者在方法中对这一过程的描述:先使用tile(hg19chromSizes,width=2500)创建2.5kb的全基因组窗口,然后构造一个 cell-by-2.5kb窗口的稀疏矩阵,随后保留前20000个可访问的窗口。并使用TF-IDF转换对二值化矩阵进行转换,接着计算逆文档频率,这种归一化的方法就会产生一个TF-IDF矩阵,然后将其用作R中irlba奇异值分解

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