本文介绍了STED、STORM和PALM三种突破光学衍射极限的超分辨显微技术。STED通过STED光束实现50纳米以下的空间分辨率，适用于活细胞成像；PALM和STORM通过单分子定位达到10纳米精度，但成像时间长，适合静态样本。这些技术在生命科学中有着广泛应用，尤其在单分子成像和生物过程研究中扮演重要角色。
原文地址：
STED和STORM、PALM
作者：
pengnei
http://www.china-stvc.org/article/show/860.aspx
微成像的非侵入性、可穿透性以及对样品无损伤等优点，当今生命科学中的显微成像研究大约80％仍然使用光学显微镜。但是由于光学衍射的限制，传统光学显微镜只能达到波长量级的空间分辨率（一般在200nm-500nm），限制了它在纳米尺度对生物分子结构和功能进行研究中的应用。
受激辐射耗尽（Stimulated emission depletion-STED）显微镜通过使用一束STED光束形成空壳形状焦斑，将衍射光斑周围的荧光分子转换为非辐射态，实现了好于50纳米的空间分辨率。由于使用全光设置，图像采集时间大致与普通共聚焦显微镜相同，对样品准备没有特殊要求，因此可以实现活细胞内生物分子的实时成像和动态跟踪。STED显微镜要求激发和STED两束光，STED波长位于荧光标记发射波长的红限，并且要求STED光束比激发光束延迟几个皮秒，以便及时将激发光激发的荧光分子退激发，所以STED显微镜的困难在于STED光束波长的选择以及两列脉冲的同步调节，技术难度较大，设备花费也非常昂贵。
近几年各国研究人员提出了几种突破衍射极限的方法。其中光活化定位显微镜（Photoactivat
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