storm显微镜成像原理_超分辨率显微镜技术原理概述

原标题：超分辨率显微镜技术原理概述

如今，科学家们已经研发了多种超分辨率技术，远远超出了衍射J限，能够观察到分子尺度的细节。SRM技术可以将细胞结构解析为亚细胞水平，从而获取有关细胞组分的3D结构的信息，并可以观察到单分子共定位。

下面我们来简要概述了时下几种流行的SRM技术的原理：

1.受激发射耗竭(STED)显微镜

STED对于有经验的荧光显微镜使用者来说相对简单，该方法和普通共聚焦显微镜(Confocal)的原理相同。普通Confocal使用单光源，而STED使用双光源。其中一个光源发射能激发荧光团——荧光标签(研究者们以此来定位和观察蛋白)的光，另一个光源发出不同波长的光，用于抑制荧光。这束光是环形的，并且与束光有所重叠，因此只有环形中间区域的分子会继续发出荧光。

获得STED超分辨率图片并没有那么复杂，用户需要仔细调整参数，才能得到漂亮的结果，否则所得图片和普通confocal没有差别。

使用传统和RESCue受激发射减损显微镜(STED)得到的细胞核膜上核孔复合体的图片。

STED的原理：

显微镜透镜对光的衍射会导致来自单个点的光出现在较大的区域，这称为点扩散函数(PSF)(见图1)，由于PSF的存在，使得常规显微镜无法达到超分辨。

图1：在普通光学显微镜中，成像是通过将来自点光源的光线会聚到像平面上的单个点来实现的。超出光衍射的限制，防止