2 是 Src 蛋白酪氨酸激酶家族的有效、可逆、ATP 竞争性和选择性抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

CAS：172889-27-9

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存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：PP2 是 Src 蛋白酪氨酸激酶家族的有效、可逆、ATP 竞争性和选择性抑制剂，IC50 为 4 和Lck 和 Fyn 分别为 5 nM。 IC50 和目标：IC50：4 nM (Lck)，5 nM (Fyn)[1] 

体外：在 10 μM 时，PP2 对细胞增殖的影响不显着，表明在这个低浓度下，PP2 对吉西他滨细胞毒性的影响不仅仅反映了直接的抗增殖作用，而是吉西他滨诱导的细胞毒性的增强。高于 20 μM，生长受到越来越多的抑制，这一发现与其他人类癌细胞系的报告一致。尽管在我们的研究中使用了 10 μM PP2，但据报道，在较高浓度下，PP2 会抑制其他细胞内激酶[2]。 PP2 是使用最广泛的市售 Src 家族激酶抑制剂。 PP2 抑制 Src 家族激酶活性，体外 IC50 约为 5 nM，在细胞培养中实现完全 Src 家族激酶抑制通常需要 10 μM 的浓度[3] .

体内：PP2治疗组肿瘤生长抑制率为25%，吉西他滨治疗组为5%（P>0.05）。当联合给药时，PP2 和吉西他滨产生的肿瘤生长抑制率为 98%（P<0.05）。肝转移发生在 100% 的对照组和吉西他滨治疗组； 88% 的 PP2 治疗组发生了肝转移。 PP2联合吉西他滨治疗组未发现转移灶（P<0.05）[2]。

细胞试验：通过MTT测定测定细胞生长并通过细胞计数确认。 MTT 测定的结果已被证明与胰腺癌细胞系中的[3H]胸苷掺入密切相关。将对数生长的细胞以 5×103 个细胞/孔铺在 96 孔板中，使其粘附 24 小时，并在存在或不存在 PP2 和吉西他滨的情况下培养。 96小时后测定细胞增殖。使用 Vmax 微孔板分光光度计在 570 nm 波长下读取板，校正至 650 nm 并标准化为对照。每个独立实验进行 3 次，每个测试条件进行 10 次测定。根据这些结果计算吉西他滨的 IC50。在相同的时间点，将细胞用胰蛋白酶消化以形成单细胞悬浮液。通过台盼蓝排除法测定的完整细胞，使用 Neubauer 血细胞计数器进行计数，计算每 mL 的细胞数并与对照组进行比较，以确认 MTT 结果[2]。

动物体内实验:小鼠[2] 雄性无胸腺 nu/nu 小鼠（年龄，5 周；体重，20-22 g；无特定病原体）用腹腔注射氯胺酮（200 mg/kg）和甲苯噻嗪（10 mg/kg）麻醉，并接种 106通过手术原位植入胰腺中的 20 μL PBS 中的吉西他滨耐药 PANC1GemRes 细胞。接种后，将小鼠随机分为三个治疗组：（a）治疗组1（n = 8）通过腹腔注射每周3次接受2 mg/kg PP2的1% DMSO溶液； (b) 治疗组 2 (n=8) 接受与组 1 相同体积的 1% DMSO 媒介物中的吉西他滨 (100 mg/kg)，每周 3 次； (c)治疗组3(n=8)接受与组1和组2相同体积的DMSO中的2mg/kg PP2和100mg/kg吉西他滨，每周3次。对照组接受与其他组相同体积的1% DMSO载体，每周3次。治疗在植入后1天开始，并在植入后4周进行尸检。原发性肿瘤被识别、称重并标准化为总体质量。使用以下公式计算肿瘤生长抑制率：肿瘤生长抑制率(%)=(1-MT/MC)×100，其中MT和MC分别是治疗组和对照组的平均归一化肿瘤质量。对肝转移进行计数并进行组织学确认。

 

参考文献：

[1]. Hanke JH, et al. Discovery of a novel, potent, and Src family-selective tyrosine kinase inhibitor. Study of Lck-and FynT-dependentT cell activation. J Biol Chem. 1996 Jan 12;271(2):695-701.

[2]. Duxbury MS, et al. Inhibition of SRC tyrosine kinase impairs inherent and acquired Gemcitabine resistance in human pancreatic adenocarcinoma cells. Clin Cancer Res. 2004 Apr 1;10(7):2307-18

[3]. Summy JM, et al. AP23846, a novel and highly potent Src family kinase inhibitor, reduces vascular endothelial growth factor and interleukin-8 expression in human solid tumor cell lines and abrogates downstream angiogenic processes. Mol Cancer Ther. 2005 D

[4]. Inoue A, et al. Phosphorylation of NMDA receptor GluN2B subunit at Tyr1472 is important for trigeminal processing of itch. Eur J Neurosci. 2016 Oct;44(7):2474-2482.