玩转单细胞(7):修改Seurat对象基因名称

玩转单细胞(2):Seurat批量做图修饰玩转单细胞(3):堆叠柱状图添加比例
玩转单细胞(4):单细胞相关性
玩转单细胞(5):单细胞UMAP图只标记特定细胞群、圈定细胞群及坐标轴修改
玩转单细胞(6):单细胞差异基因展示之对角散点图
之前的玩转单细胞系列,还是受到很多人的喜欢的,这里的都是一些小问题,但是遇到的话一时半会觉得无从下手,因为都是写细枝末节的问题,学习了也是锦上添花。同样的,今天的问题也是一直以来没有想过的,只不过是在做项目的时候需要,查询了相关的解决办法,这里分享验证一下。问题:我们在构建seurat对象的时候,使用表达矩阵,基因名一般是gene symbol,如果是ID的话,网上的教程也是建议转为symbol再构建,因为构建好seurat后无法修改,确实是,因为seurat没有专门的函数进行修改。另外就是进行同源转化的时候,只有seurat对象,那就很难受。 解决办法:在阅读一篇文章的时候作者写过一个函数,github上也有:

RenameGenesSeurat <- function(obj = ls.Seurat[[i]], newnames = tmp) { # Replace gene names in different slots of a Seurat object. Run this before integration. Run this before integration. It only changes obj@assays$RNA@counts, @data and @scale.data.
  print("Run this before integration. It only changes obj@assays$RNA@counts and @data ")
  RNA <- obj@assays$RNA

  if (nrow(RNA) == length(newnames)) {
    if (length(RNA@counts)) RNA@counts@Dimnames[[1]]            <- newnames
    if (length(RNA@data)) RNA@data@Dimnames[[1]]                <- newnames
    # if (length(RNA@scale.data)) RNA@scale.data@Dimnames[[1]]    <- newnames
  } else {"Unequal gene sets: nrow(RNA) != nrow(newnames)"}
  obj@assays$RNA <- RNA
  return(obj)
}

但是后来在一个帖子上发现,作者说github的函数不是通用形的,且不能全局修改,作者提供了一种改写函数。为了尊重劳动成果,这里就不直接贴出来函数了,附上作者函数的帖子,自行查看:如何给Seurat对象的基因重命名?【基因名转换】2022-07-27 - 简书这里我们进行演示,看看效果,我们用小鼠的seurat对象进行人同源转化:这里也提一种同源转化R包homologene。

library(Seurat)
library(nichenetr)
library(dplyr)
install.packages('homologene')
library(homologene)#基因同源转化R包
# homologene::taxData
#    tax_id                      name_txt
# 1   10090                  Mus musculus
# 2   10116             Rattus norvegicus
# 3   28985          Kluyveromyces lactis
# 4  318829            Magnaporthe oryzae
# 5   33169         Eremothecium gossypii
# 6    3702          Arabidopsis thaliana
# 7    4530                  Oryza sativa
# 8    4896     Schizosaccharomyces pombe
# 9    4932      Saccharomyces cerevisiae
# 10   5141             Neurospora crassa
# 11   6239        Caenorhabditis elegans
# 12   7165             Anopheles gambiae
# 13   7227       Drosophila melanogaster
# 14   7955                   Danio rerio
# 15   8364 Xenopus (Silurana) tropicalis
# 16   9031                 Gallus gallus
# 17   9544                Macaca mulatta
# 18   9598               Pan troglodytes
# 19   9606                  Homo sapiens
# 20   9615        Canis lupus familiaris
# 21   9913                    Bos taurus
# A <- homologene(rownames(mouse_data), inTax = 10090, outTax = 9606)
# inTax输入物种、outTax输出物种
#将鼠的基因名转化为人的
mouse_data <- readRDS("D:/mouse_data.rds")
gene_trans = rownames(mouse_data) %>% convert_mouse_to_human_symbols()
gene_trans <- as.data.frame(gene_trans)
gene_mouse <- as.data.frame(rownames(mouse_data))
gene_use <- cbind(gene_trans, gene_mouse)
gene_use <- na.omit(gene_use)
mouse_data_trans <- subset(mouse_data,features=gene_use$`rownames(mouse_data)`)

#转化
mouse_data_trans <- RenameGenesSeurat(mouse_data_trans, 
                                      newnames = gene_use$gene_trans,
                                      gene.use = gene_use$`rownames(mouse_data)`,
                                      de.assay = 'RNA')

转化前:

转化后:


可以看到,转化后不论是哪个assay,都变成了人的基因。接下来我们做一下差异基因的分析,看看会不会出错。发现没有任何问题。而且作图也是一样的,说明转化的成功。

#测试一下,差异基因
DEGs <- FindMarkers(mouse_data_trans, 
                    min.pct = 0.25,
                    logfc.threshold = 0.25,
                    group.by = "orig.ident",
                    ident.1 ="10X_ntph_F",
                    ident.2="10X_ntph_M")

DEGs1 <- FindMarkers(mouse_data, 
                    min.pct = 0.25,
                    logfc.threshold = 0.25,
                    group.by = "orig.ident",
                    ident.1 ="10X_ntph_F",
                    ident.2="10X_ntph_M")

p1 <- FeaturePlot(mouse_data_trans, features = 'LTF')
p2 <- FeaturePlot(mouse_data, features = 'Ltf')
p1|p2

最后,我们对这个数据进行重聚类,发现这个过程没有任何问题!


#重聚类
mouse_trans_human <- ScaleData(mouse_data_trans, vars.to.regress = c("nCount_RNA"), verbose = FALSE)
mouse_trans_human <- FindVariableFeatures(mouse_trans_human, nfeatures = 4000)
mouse_trans_human <- RunPCA(mouse_trans_human, npcs = 50, verbose = FALSE)
mouse_trans_human <- FindNeighbors(mouse_trans_human, reduction = "pca", dims = 1:50)
mouse_trans_human <- FindClusters(mouse_trans_human, resolution=0.8)
mouse_trans_human <- RunUMAP(mouse_trans_human, reduction = "pca", dims = 1:50)
DimPlot(mouse_trans_human, label = T,pt.size = 1)

最后,再次感谢这个提供函数的作者,这个函数特别有用,不仅在需要同源转化的分析中,在跨物种的分析中也同样适用。觉得分享有用的点个赞、分享下再走呗。更多精彩请至我们的公众号===KS科研分享与服务

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