单细胞 | CellChat(一) · 单样本细胞互作

一.生成cellchat文件,选择数据库

library(CellChat)
library(ggplot2)
library(ggalluvial)
library(svglite)
library(Seurat)
library(SeuratData)

#创建CellChat文件
cellchat <- createCellChat(object = sc, meta = sc@meta.data, group.by = "celltype")

#设置配体-受体相互作用数据库
CellChatDB <- CellChatDB.mouse #use CellChatDB.human if running on human data
showDatabaseCategory(CellChatDB)
cellchat@DB <- CellChatDB
#CellChatDB.use <- subsetDB(CellChatDB, 
                            search = "Secreted Signaling", 
                            key = "annotation") #也可选择指定数据库
cellchat <- subsetData(cellchat) 

二.处理表达数据

cellchat <- subsetData(cellchat)
#识别过表达基因
cellchat <- identifyOverExpressedGenes(cellchat)
#识别过表达配体受体对
cellchat <- identifyOverExpressedInteractions(cellchat)
cellchat <- projectData(cellchat,PPI.mouse)
#推断cell-cell communication network
cellchat <- computeCommunProb(cellchat,raw.use = F,population.size = TRUE)
cellchat <- filterCommunication(cellchat,min.cells = 10)
#计算每个信号通路相关的所有配体-受体相互作用的通信结果
cellchat <- computeCommunProbPathway(cellchat)
#计算整合的细胞类型之间通信结果
cellchat <- aggregateNet(cellchat)

三.可视化1:celltype之间通讯结果

groupSize <- as.numeric(table(cellchat@idents))
par(mfrow = c(1,2), xpd=TRUE)
netVisual_circle(cellchat@net$count, vertex.weight = groupSize, 
                 weight.scale = T, label.edge= F, 
                 title.name = "Number of interactions")
netVisual_circle(cellchat@net$weight, vertex.weight = groupSize, 
                 weight.scale = T, label.edge= F, 
                 title.name = "Interaction weights/strength")

mat <- cellchat@net$weight
par(mfrow = c(3,4), xpd=TRUE)
for (i in 1:nrow(mat)) {
  mat2 <- matrix(0, nrow = nrow(mat), ncol = ncol(mat), 
                 dimnames = dimnames(mat))
  mat2[i, ] <- mat[i, ]
  netVisual_circle(mat2, vertex.weight = groupSize, 
                   weight.scale = T, edge.weight.max = max(mat), 
                   title.name = rownames(mat)[i])
}

可视化2:特定信号通路的互作情况

pathways.show <- c("CXCL") 
netVisual_heatmap(cellchat, signaling = pathways.show, color.heatmap = "Reds")

可视化3:计算并可视化网络中心性分数

cellchat <- netAnalysis_computeCentrality(cellchat, slot.name = "netP") 
netAnalysis_signalingRole_network(cellchat, 
                     signaling = pathways.show, 
                     width = 8, height = 2.5, font.size = 10)

可视化4:根据结构相似性和功能相似性识别信号组 

#功能相似性
cellchat <- computeNetSimilarity(cellchat, type = "functional")
cellchat <- netEmbedding(cellchat, type = "functional")
cellchat <- netClustering(cellchat, type = "functional")
netVisual_embedding(cellchat, type = "functional", label.size = 3.5)

#结构相似性
cellchat <- computeNetSimilarity(cellchat, type = "structural")
cellchat <- netEmbedding(cellchat, type = "structural")
cellchat <- netClustering(cellchat, type = "structural")
netVisual_embedding(cellchat, type = "structural", label.size = 3.5)

netVisual_embeddingZoomIn(cellchat, type = "structural", nCol = 2)

参考:Inference and analysis of cell-cell communication using CellChat (htmlpreview.github.io) 

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### 回答1: 单细胞测序是一种利用高通量测序技术来解析基因组或基因表达水平的技术。它可以对细胞的基因组或基因组表达水平进行详细的分析,从而获得个体细胞之间的差异性、异质性和变异性。以前,研究者只能分析大量细胞的均值,而单细胞测序技术可以帮助我们更全面地理解细胞的功能。有许多类型的单细胞测序技术,其中包括基因组测序、转录组测序、表观遗传学测序和proteomics测序等。这些技术可以帮助我们更深入地理解基因组,从而帮助我们预测疾病发病机制和治疗策略。 ### 回答2: 单细胞测序是一种高通量基因测序技术,可以对细胞进行基因组学分析。传统的基因测序技术往往是对大量细胞或组织进行平均分析,这样可能掩盖了个体细胞间的差异。单细胞测序技术的出现填补了这一空白,可以揭示细胞在表达基因水平上的差异以及表型多样性。 单细胞测序的主要流程包括样本准备、细胞分离、细胞裂解、基因文库构建和高通量测序。样本准备是关键步骤,需要选择适当的细胞类型和状态,同时确保细胞完整性和无污染。细胞分离可以使用机械或酶消化的方法,使细胞得到分离。细胞裂解则是将细胞的RNA或DNA释放出来,常用的方法有热裂解、酶裂解和化学裂解。 在基因文库构建过程中,需要对提取到的RNA或DNA进行反转录或扩增,得到cDNA文库。然后,通过添加barcode和适配子等步骤,标记样品,以便后续对不同细胞的分辨。最后,将标记的文库进行高通量测序,获取细胞中的基因表达信息。 单细胞测序技术在生物学研究和医学领域有着广泛的应用。它可以帮助我们更好地理解细胞的分化、发育和功能调控机制。例如,通过单细胞测序,我们可以揭示胚胎发育过程中基因表达的动态变化;可以研究肿瘤细胞的发展过程和药物抗性机制;可以探究免疫细胞在感染或疾病状态下的差异等。 尽管单细胞测序技术有着广泛的应用价值,但也存在一些挑战和限制。首先,技术的准确性和灵敏度仍然需要提高。其次,高成本和复杂的分析流程对研究者们提出了要求。此外,细胞样品的处理和存储也需要特别注意,以避免样品受到污染或损坏。 总之,单细胞测序技术的出现为研究者们提供了一种有力的工具,可以深入了解细胞间的差异和多样性。随着技术的不断发展和完善,相信单细胞测序将在生命科学领域起到越来越重要的作用。 ### 回答3: 单细胞测序是一种新兴的高通量生物学技术,它已经在生命科学领域引起了广泛的兴趣和重视。传统的基因组学技术通常需要大量的细胞进行分析,而单细胞测序技术则可以对细胞的遗传信息进行测序和分析。 单细胞测序的基本原理是通过将细胞分离并进行溶解,然后进行RNA或DNA的提取,随后进行测序和分析。这种方法可以获得细胞的全基因组或全转录组的信息,从而可以更好地理解细胞的功能和特征。 在单细胞测序领域,最早应用于研究动物发育和免疫系统的细胞多样性。随着技术的发展,单细胞测序已经广泛应用于肿瘤学、神经科学、生殖生物学等各个领域。它可以揭示细胞的异质性、亚型、分化状态以及细胞之间的相互作用。 单细胞测序的技术路线主要分为两种:基于RNA测序的单细胞转录组测序和基于DNA测序的单细胞基因组测序。这两种方法均有各自的优势和适用场景。例如,单细胞转录组测序可以研究细胞的转录和表达谱,而单细胞基因组测序则可以研究细胞的突变和变异。 虽然单细胞测序技术在生物研究中具有广泛的应用前景,但仍然存在一些技术挑战。例如,单细胞的提取和分离、RNA或DNA的放大和测序、数据处理和分析等都需要仔细的操作和高度的精确性。 总的来说,单细胞测序是一项具有潜力的生物学技术,它可以为我们提供更加深入的细胞层面的理解。随着技术的进一步发展和完善,单细胞测序必将在生命科学研究中发挥越来越重要的作用。

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