KEGG更新后富集分析的问题,包括下载包以及enrichKEGG和可视化

运行以下代码出现报错,探究原因:

enrichKK <- enrichKEGG(gene = gene_up,
                       keyType = 'kegg',
                       organism = 'hsa',
                       pvalueCutoff = 0.2,
                       qvalueCutoff =0.2,
                       use_internal_data = TRUE)
barplot(enrichKK, x = 'GeneRatio', color = 'p.adjust', #默认参数
        showCategory =10) #只显示前10

出现以下报错:

Error in ans[ypos] <- rep(yes, length.out = len)[ypos] : 
  replacement has length zero
In addition: Warning message:
In rep(yes, length.out = len) : 'x' is NULL so the result will be NULL

进行解决,查到第一个解决方法是把阈值降低,即将

pvalueCutoff = 0.01,qvalueCutoff = 0.05,

修改为:

pvalueCutoff = 0.2,qvalueCutoff = 0.2,

但是依旧有以上报错,不断尝试网上的方法依然有问题,发现还是clusterProfiler包的问题,昨天在进行clusterProfiler做KEGG富集分析时出现了错误,昨天发现是KEGG数据库的API更新了,在使用了很多大牛的方法,比如说Y叔的,但是还是报错,依旧显示

--> No gene can be mapped....
--> Expected input gene ID:
--> return NULL...

我的代码为:

enrichKK <- enrichKEGG(gene = gene_up,
                       keyType = 'kegg',
                       organism = 'hsa',
                       pvalueCutoff = 0.05,
                       qvalueCutoff = 0.05)

甚至在安装clusterProfiler包的时候不断出现问题,无论是使用github访问

devtools::install_github("YuLab-SMU/DOSE")
devtools::install_github("YuLab-SMU/HDO.db")   
devtools::install_github('YuLab-SMU/clusterProfiler')  

还是下载clusterProfiler最新版然后安装,重启R后加载新包

install.packages('~/Downloads/clusterProfiler_4.6.1.tgz',repos = NULL, type="source")
install.packages('~/Downloads/DOSE_3.24.2.tgz',repos = NULL,type = 'source')
install.packages('~/Downloads/GOSemSim_2.24.0.tgz',repos = NULL,type = 'source')
install.packages('~/Downloads/HDO.db_0.99.1.tar.gz',repos = NULL,type = 'source')

都会显示问题,最后无奈去Bioconductor下载压缩包,手动导入前三个包,再在github上下载最新的clusterProfiler压缩包或者网络好的情况下

devtools::install_github('YuLab-SMU/clusterProfiler')

终于将clusterProfiler包下载到R中

需要注意的是一共需要下载四个包,顺序为:GOSemSim DOSE HDO.db clusterProfiler

虽然包下载成功,但是在运行enrichKEGG代码时,又会出现上方的错误。

继续进行检索,在参考了一篇CSDN的文章(23条消息) 使用R语言包clusterProfiler做KEGG富集分析时出现的错误及解决方法_HJ_Tan的博客-CSDN博客后。发现似乎解决了问题,即把“~/KEGG.db_1.0.tar.gz”手动安装,最后成为KEGG.db包,再使用library导入后

enrichKK <- enrichKEGG(gene = gene_up,
                       keyType = 'kegg',
                       organism = 'hsa',
                       pvalueCutoff = 0.05,
                       qvalueCutoff = 0.05,
                       use_internal_data = T)

昨天在运行完这些步骤后,enrichKEGG似乎可以生成结果了,但是在运行绘制dotplot,barplot的程序时又出现了开头的问题,真的要癫狂了!!!

又要从头再来解决clusterProfiler包的问题,因为我的同门之前在KEGG更新后同样是重装了包,她就可以直接运行了,难道是电脑的问题,真的怀疑人生了。

在安装clusterProfiler包时,要注意不要将R版本更新到4.2.3,直接使用4.2.2版本即可

在手动导入DOSE包时,又出现了新的问题:

Error in loadNamespace(i, c(lib.loc, .libPaths()), versionCheck = vI[[i]]) : 
  namespace 'rlang' 1.0.6 is already loaded, but >= 1.1.0 is required

又去更新rlang包,重启R之后再导入rlang压缩包

注意:如果在导入某个r包时,不显示xxx保存的状态不是0时,出现其他的错误,重启R可能会安装成功

然后重新按照之前的步骤将每个包安装,终于解决了问题:

注意:不要将“~/KEGG.db_1.0.tar.gz”手动安装,而且在代码中要将use_internal_data = T
enrichKK <- enrichKEGG(gene = gene_up,
                       keyType = 'kegg',
                       organism = 'hsa',
                       pvalueCutoff = 0.05,
                       qvalueCutoff = 0.05,
                       use_internal_data = T)

可喜可贺!终于在历时两天将问题解决,希望大家都可以把问题成功解决

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