实验室常用培养基配置 LB LA

本文详细介绍了如何配置LB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基和一般固体培养基,包括各组分的浓度、配置步骤和注意事项。还探讨了关键成分如胰蛋白胨、酵母提取物、氨苄西林、IPTG和X-Gal的作用及其在实验中的用途。
摘要由CSDN通过智能技术生成

LB/Amp/X-Gal/IPTG 平板培养基

  1. 组分浓度:

1%(W/V)          Tryptone
0.5%(W/V)        Yeast Extract
1%(W/V)          NaCl
0.1 mg/ml          Ampicillin
0.024 mg/ml        IPTG
0.04 mg/ml         X-Gal
1.5%(W/V)        Agar   

  1. 配置量:1L
  2. 配置方法:
  • 称取下列试剂,置于1L烧杯中。

Tryptone           10g
Yeast Extract      5g
NaCl              10g

  • 加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
  • 滴加5N NaOH(约0.2ml),调节PH值至7.0。
  • 加去离子水将培养基定容至1L后(此处LB的配置过程已经完成如果不做后面的,高温高压灭菌后4度保存即可),加入15gAgar(此步是在配置一般固体培养基)。
  • 高温高压灭菌后,冷却至60°C保存。
  • 加入1ml Ampicillin (100mg/ml) / 1ml IPTG(24mg/ml)/2ml X-Gal (20mg/ml)后均匀混合。
  • 铺制平板(30~35ml 培养基/90mm 培养皿)。
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