菌体浓度是指单位体积培养液中菌体的含量。
常用的菌体浓度的测定方法(细菌计数方法)主要有以下几种:
1. 直接计数法
这是一种非常简单的检测方法,我们可以利用计数板或计数仪直接得出细菌数目。
1.1细菌计数板
首先制备细菌悬液,取一定体积的样品细菌悬液置于细菌计数板的计数池内,用显微镜观察计数。根据计数室刻度内的细菌数,计算样品中的含菌数。
特点:所需设备简单,测定结果较准确,可迅速得到结果,而且在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征。不能区分是否为细菌,不能区分活细菌和死细菌。
单位:个/mL
计算方法:
(1)25×16的计数板:
每毫升细菌数量=(100小格内的细胞数/100)×400×1000×稀释倍数
(2)16×25的计数板:
每毫升细菌数量=(80小格内的细胞数/80)×400×1000×稀释倍数
1.2 电子计数器计数法
电子计数器也属于直接计数法,其工作原理类似于血细胞分析仪,测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细菌,当一个细菌通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。
计数单位:个/mL
特点:该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。
2. 活菌计数法
常用的有平板菌落计数法(cfu法),其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。取一定容量的细菌悬液,制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下ÿ