PMA的应用

基于核酸的分子生物学检测方法，如聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR），能够用于精准地分析样本中微生物的种类和丰度，但是难以区分微生物的存活状态。传统的用于检测样本中活细胞的方法都需要对样本进行培养，但是此类检测方法存在一定的局限性，无法用于检测一些难培养或是不可培养的活细胞。叠氮溴化丙锭（Propidium monoazide，PMA）是一种能与DNA结合的光反应染料，不具有细胞膜渗透性，无法穿透活细胞完整的细胞膜，只能选择性地穿透死细胞受损的细胞膜。进入细胞后，PMA会与DNA双螺旋发生共价交联，进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增，如图1所示。基于PMA的这一特性，通过对PMA处理过的样本进行PCR扩增和测序分析，即可得知样本中微生物的存活状态。

 图1.PMA的作用原理示意图

现在已经有越来越多的文献报道采用了PMA-PCR或PMA-qPCR等方法对样本中的活细胞进行定性或定量分析，下面解读三篇文献。

文献一：Andreas N, Katherine ES, Anne KC. M