胚胎植入是一个复杂的过程,受多种因素影响,尤其是子宫内膜(endometrium)与胚泡(blastocyst)之间的相互作用。子宫内膜接受性(Endometrial Receptivity, ER)是指子宫内膜在适当的功能状态下,允许胚泡的滋养层(trophectoderm)粘附并侵入子宫内膜。ER对于成功的胚胎植入和健康妊娠至关重要,也是辅助生殖技术(ART)成功的关键因素。
尽管对ER的理解有所增加,但如何改善ER以促进妊娠建立仍然是一个挑战。长非编码RNA(lncRNA)是一类非编码RNA,通常认为它们不编码蛋白质。
然而,最近的研究发现许多lncRNA实际上包含短的开放阅读框(ORFs),能够与核糖体相互作用并被翻译成微肽。这些微肽在正常发育和人类病理发生中起着重要作用。
研究人员使用WGCNA(加权基因共表达网络分析)和生物信息学工具Translnc筛选与ER相关的具有编码潜力的lncRNA。使用人类Ishikawa子宫内膜细胞和JAR滋养层细胞系进行实验。
通过构建含有LINC00339-205-49aa ORF序列的质粒,并将其转染到Ishikawa细胞中。通过免疫印迹(immunoblotting)和免疫荧光显微镜(IF)观察LINC00339-205-49aa在Ishikawa细胞中的表达。
然后,使用CCK-8和Calcein-AM/PI双染色法评估细胞活力,并评估JAR细胞球体与Ishikawa细胞的粘附情况。最后,使用RNA测序(RNA-seq)分析了LINC00339-205-49aa在Ishikawa细胞中的下游分子过程。
用ANOVA和Student t-test对实验数据进行了分析,结果表明LINC00339与ER发展相关,具有编码49个氨基酸肽段(LINC00339-205-49aa)的潜力。LINC00339-205-49aa能够促进JAR滋养层球体与Ishikawa子宫内膜细胞的粘附,并上调E-cadherin的表达。LINC00339-205-49aa通过激活MAPK和PI3K-Akt信号通路来调节其在Ishikawa细胞中的作用。
这项研究揭示了lncRNA编码的微肽在胚胎植入过程中的潜在作用,为开发改善ER的工具提供了新的思路。
未来的研究可能会进一步探索LINC00339-205-49aa在体内模型中的作用,以及它是否能够通过激活MAPK和PI3K-Akt信号通路来增强滋养层细胞与子宫内膜细胞的粘附。
此外,可能还会探索LINC00339-205-49aa在其他生殖相关过程中的作用,以及它是否能够作为预测ER的生物标志物。这些发现可能对提高ART的成功率和理解胚胎植入的分子机制具有重要意义。