storm显微镜成像原理_生命科学与医学领域概述：知微见著-超高分辨率显微镜STORM...

原标题：生命科学与医学领域概述：知微见著-超高分辨率显微镜STORM

超高分辨率

显微镜STORM

正文

前言：

我们知道，在生命科学领域中最常用的光学显微镜，是用可见光来观察生物样品。而光是一种横波，当它经过一个圆孔，且这个圆孔的大小与光的波长差别不大时，光在此时不会沿直线传播，而是在各个方向上“溜走”。这就是衍射，由此而形成的圆孔衍射图样叫“爱里斑”(图1)。正因如此，任何一种显微镜系统都无法把光线在像平面汇聚成无限小的点，而是形成有限大小的爱里斑。如果两个点很接近，像平面上的两个爱里斑就几乎重合在一起，那物平面上的两个点就不可分辨了。

图1 “爱里斑”概念图

科研工作者为了看到更精细的生命体精细结构，就要想办法突破这一成像障碍。为此，“八仙过海，各显神通”，多种超分辨率显微镜被开发了出来。在这里我们集中讨论其中一项技术：STORM技术，并介绍其在生命科学领域中的运用。

STORM技术简介：

正如前面提到的那样，两个挨得很近的光点会让我们分辨不出谁是谁，那么如果我们分开来看呢？也就是说，当我们照射并观察第一个点时，第二个点并不会发光，自然不会产生爱里斑影响我们观察第一个点，前者爱里斑的中心点位置就是荧光分子的准确位置。接下来，我们通过某种方法，让第二个点被照亮。这个时候第一个点又不在光斑的照明范围之内了，同样不会干扰我们对第二个点的观察。如果样品中还有更多的点，我们只需要将它们一个一个看清楚。通过这种“以