在基因工程中的重组DNA构建的实验中,往往需要用限制性核酸内切酶对DNA分子进行切割,已得到目的基因,但DNA分子上可能含有多个酶切位点,因此需要认为的计算酶切后得到的DNA片段(fragements)大小的分子量,以便后续电泳中可以根据Marker得到目的基因的片段,但对于酶切后得到的片段较多时,人工的计算片段的分子量较为耗时,因此这里特异根据《生物科学家的Python指南》一书,写了这篇文章以计算限制性核酸内切酶切割DNA分子后得到的片段分子量。
1.如何计算DNA片段的分子量?
这里用for循环写了一个函数,然后用一段DNA序列(
gcgatgctaggatccgc
)演示了函数的用法,具体代码如下:
#定义计算DNA片段的分子量大小的函数
def oligoMolecularWeight(seqence):
dnaMolecularWeight = {'a': 313.2, 'c': 289.2, 't': 304.2, 'g': 329.2}
molecularWeight = 0.0
for base in seqence:
molecularWeight += dnaMolecularWeight[base]
return molecularWeight
#示例
print(oligoMolecularWeight('gcgatgctaggatccgc'))
最后计算得到的结果为5273.399999999999。
2.find函数查找酶切位点在DNA上的位置,下面列了find函数运行后的结果:
mySequence = 'gcgatgctaggatccgcgatcgcgtacgatcgtacgcggtacggacggatccttctc'
print(mySequence.find('ggatcc'))
#运行结果:9
print(mySequence.find('ggatttt'))
#运行结果-1
由示例可以看出find函数在搜索字符串(‘ggatttt’) 时,因序列中无ggatttt,因此放回的是-1,表示未找到子字符串。
PS:find函数不能对“没有发现”返回零,因为这实际上是Python字符串中第一个位置的索引,如果返回零,则表示在该位置找到了这个子字符串。
3.while语句遍历整个DNA序列
mySequence = 'gcgatgctaggatccgcgatcgcgtacgatcgtacgcggtacggacggatccttctc'
found = 0
searchFrom = found
while found != -1:
found = mySequence.find('ggatcc',searchFrom)
if found != -1:
print('Substring found at:',found)
searchFrom = found +1
=====================================================================
运行结果:
Substring found at: 9
Substring found at: 46
4.合并计算分子量和酶切得到DNA片段的函数
#创建限制性核酸内切酶的切割位点
restrictionEnzymes = {}
restrictionEnzymes['bamH1'] = ['ggatcc',0]
restrictionEnzymes['sma1'] = ['cccggg',2]
#定义计算DNA片段的分子量大小的函数
def oligoMolecularWeight(seqence):
dnaMolecularWeight = {'a': 313.2, 'c': 289.2, 't': 304.2, 'g': 329.2}
molecularWeight = 0.0
for base in seqence:
molecularWeight += dnaMolecularWeight[base]
return molecularWeight
#定义酶切函数
def restrictionDigest(sequence,enzyme):
#将限制性核酸内切酶的切割序列和切割位点分别赋值给motif和cutPosition
motif = restrictionEnzymes[enzyme][0]
cutPosition = restrictionEnzymes[enzyme][1]
#提前创建用来存储切割后得到的酶切片段序列及其分子量的列表
fragments = []
#found表示上次找到的限制性核酸内切酶位点序列的起始位置
found = 0
#lastCut用来存储上次切割DNA的位置
lastCut = found
#searchFrom用来告诉我们下次从哪开始找出酶切序列
searchFrom = lastCut
#while循环遍历DNA序列
while found != -1:
found = sequence.find(motif,searchFrom)
if found != -1:
fragment = sequence[lastCut:found+cutPosition]
wnt = oligoMolecularWeight(fragment)
fragments.append((fragment,wnt))
else:
fragment = sequence[lastCut:]
wnt = oligoMolecularWeight(fragment)
fragments.append((fragment,wnt))
lastCut = found+cutPosition
searchFrom = lastCut+1
return fragments
#用法示例
digestSquence = 'gcgatgctaggatccgcgatcgcgtacgatcgtacgcggtacggacggatccttctc'
print(restrictionDigest(digestSquence,'bamH1'))
总结:大家只需要根据自己的需求添加所需的限制性核酸内切酶到字典,然后根据自己的序列进行运行就可以得到结果。