导读
目前,NGS技术已经广泛的应用于精准医疗诊断和科学研究,在整个NGS建库操作流程中,测序文库的纯化和分选对于获得有效的测序数据量至关重要。今天,小编就带您了解一下核酸纯化和分选小能手——DNA磁珠。
什么是DNA磁珠?
细小的氧化铁颗粒(如Fe3O4)是磁珠的主要成分,其具有超顺磁性,只有存在外部磁场时才会具有磁性,不会在磁场之外相互吸引,从而避免结块。磁珠表面不同的涂层和化学性质使得磁珠具有不同的结合特性,可以用于核酸,蛋白质或其它生物分子的分离和纯化。磁珠的易用性可以适配自动化平台,非常适合PCR的样本制备、NGS文库制备及分子诊断等。
DNA磁珠工作原理
基于SPRI (Solid Phase Reversible Immobilization)技术,当存在PEG和NaCl的条件下,DNA构象发生急剧变化,暴露出磷酸骨架上的磷酸基因(带负电荷)与磁珠表面的羧基结合。带负电荷的磷酸基团借助解离的Na+与羧基之间形成离子桥,使DNA被特异性吸附到磁珠表面。最终利用磁珠的磁性在磁场环境中进行分离和洗脱。
DNA磁珠应用
1.DNA纯化