DAP-seq技术实验流程和原理（DAP-seq和ChIP-seq的不同特点）和适用物种（对象）范围

DAP-seq

在基因组水平上，鉴定转录因子的结合位点（transcription factor binding sites, TFBS）非常重要。ChIP-seq是进行体内检测TFBS的主要方法。然而，ChIP-seq依赖于抗体质量，这对低表达的蛋白质具有很大的挑战性。所以，ChIP-seq通常在规模上受到限制，难以进行高通量扩展。因此，只有少数转录因子可以获得结合位点信息，大量TFBS的覆盖范围仅适用于人类和一些模式生物。

DAP-seq具有与ChIP-seq同样的功能。通过体外蛋白表达技术，表达出带有标签的转录因子，和基因组DNA文库在体外进行结合，然后分离出所有与转录因子结合的DNA，再使用高通量测序，找到转录因子的结合位点。

DAP-seq是ChIP-seq的重要补充方法，可以应用于模式和非模式物种，一般来说，有参考基因组的物种都可以进行DAP-seq，如果没有参考基因组，数据下机之后是无法进行数据分析的，但是可以考虑使用近缘物种的参考基因组进行分析。

DAP-seq和ChIP-seq的特点

实验流程图

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2022年8月，广西大学农学院甘蔗生物学重点实验室/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室张木清/姚伟研究团队在**Journal of Experimental Botany（IF=7.298）**在线发表了题为“ScAIL1 modulates plant defense responses by targeting DELLA and regulating GA and JA signaling”的研究论文，该研究发现了一个甘蔗新的AP2家族转录因子ScAIL1，通过靶向DELLA调节JA与GA合成，平衡植物生长与防御。

2022年8月，安徽农业大学、中国水稻研究所和上海市农业科学院作物育种栽培研究所在**The Plant Journal（IF=5.726）**期刊联合发表了题为“OsSGT1 promotes melatonin-ameliorated seed tolerance to chromium stress by affecting the OsABI5-OsAPX1 transcriptional module in rice”的文章，揭示了OsSGT1和ABI5相互作用，调控OsAPX1的表达，促进褪黑素改善种子在铬污染条件下萌发的分子机制。

2022年8月，扬州大学生物科学与技术学院、植物功能基因组学教育部重点实验室高勇课题组在**The Plant Cell（IF=12.085）**上在线发表了题为“Phytochrome Interacting Factor Regulates Stomatal Aperture by Coordinating Red Light and Abscisic Acid”的研究论文，揭示了光敏色素互作因子（phytochrome interacting factors, PIFs）通过协调红光和脱落酸（ABA）信号调节气孔开度的分子机制。

2022年7月，北京市农林科学院玉米DNA指纹及分子育种北京市重点实验室、齐鲁师范大学玉米分子育种研究院的共同研究成果，在国际知名学术期刊**Theoretical and Applied Genetics(IF=5.574)**上发表，题目为“ A newly characterized allele of ZmR1 increases anthocyanin content in whole maize plant and the regulation mechanism of diferent ZmR1 alleles”。本文主要研究内容是鉴定了玉米花青素合成相关等位基因ZmR1CQ01，并揭示了3个ZmR1等位基因的生物学功能和分子调控机制。

2022年5月，中科院植物所王雷研究组在**Plant Physiology（IF=8.005）**期刊上发表了题为“Rice CIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED1 transcriptionally regulates ABA signaling to confer multiple abiotic stress tolerance”的研究成果。该研究揭示了OsCCA1调控水稻适应盐胁迫、干旱胁迫以及渗透胁迫的分子机制。其中，该研究使用了DNA亲和纯化测序技术（DAP-seq，DNA Affinity Purification Sequencing），鉴定了水稻生物钟核心组分OsCCA1（Oryza sativa CIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED 1）调控的下游靶基因。

2020年4月，北京工商大学与蓝景科信合作，**Biochemical and Biophysical Research Communications（IF=3.322）**发表了题为“ Phytochrome-interacting factors regulate seedling growth through ABA signaling”的文章，为揭示PIFs转录因子调控ABA信号转导机制提供了重要线索。

2019年9月，北京林业大学和蓝景科信合作，在植物学主流学术期刊Journal of Experimental Botany上（IF=5.36），发表了题为“Populus euphratica WRKY1 binds the promoter of H±ATPase gene to enhance gene expression and salt tolerance”的研究成果。该研究借助DNA亲和纯化测序（DNA Affinity Purification Sequencing，DAP-seq）技术，深入揭示了胡杨耐盐的分子机制。