全基因组多位点序列分型

简介

多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）是一种基于核酸序列测定的细菌分型方法。这种方法通过PCR扩增多个管家基因内部片段并测定其序列，分析菌株的变异。MLST操作简单，结果能快速得到并且便于不同实验室的比较，已经用于多种细菌的流行病学监测和进化研究。随着测序速度的加快和成本的降低，以及分析软件的发展，MLST逐渐成为细菌的常规分型方法。随着二代测序技术提供了快速、经济高效的细菌基因组测序方法，以及分析软件的发展，全基因组多位点序列分型（wgMLST）技术逐渐取代了传统的MLST Sanger测序技术。在wgMLST分型分析中考虑了更多的位点（通常为1500 – 4000），因此可以获得更高的分型分辨率。全基因组多位点序列分型被用于研究细菌的流行病学，群体生物学，致病性和进化等研究领域。

应用领域

1. 在流行病学研究中揭示细菌毒力与基因型之间的关系。
2. 追溯耐药菌株的来源和传播进程。
3. 通过对管家基因序列特征分析，研究大量具有代表性的菌株的流行病学和进化特征，从而为阻止病原菌的传播提供依据。

分析流程

1.原始下机数据处理：此步骤过滤测序质量值低的reads，保留高质量reads，进行数据质控。
2.基因组组装：使用Velvet算法进行基因组组装，得到能反映样品基因组基本情况的序列文件，并对组装结果进行评价。
3.获取等位基因ID：基于Assemblybased和Assembly free两种算法对基因组内的基因位点进行等位基因ID号的获取。
4.功能注释：针对编码基因序列进行不同数据库的功能注释和致病及耐药分析等。
5.进化分析：利用wgMLST数据构建高分辨率物种分型结果，对传染病的爆发进行解释，分析目标菌种的群体结构和进化规律，为疾病预防和控制提供数据基础。
6.基因组可视化分析：结合基因组组分分析结果和功能注释结果，展示基因组的基础研究结果。

参考文献：

1. 张少敏, 徐建国. 多位点序列分型及其应用[J]. 疾病监测, 2008, 23(010):648-650.