SNP检测实验技术介绍

SNP检测实验技术介绍

一、技术概述

单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism, SNP）是基因组中单个碱基的变异，在人类基因组中广泛存在，与疾病易感性、药物反应及个体化医疗等密切相关。通过特异性探针或深度测序精准识别SNP位点，提供基因分型、等位基因频率及功能预测分析，助力遗传机制研究与临床转化应用。

二、实验目的

通过检测样本中目标SNP位点的基因型（如AA、AG、GG），分析其与表型（疾病、药物疗效、性状等）的关联性，为疾病研究、个体化用药等领域提供数据支持。  

三、实验流程
1、DNA抽提

取200ul全血至1.5mL离心管中，严格按照“TIANamp Genomic DNA Kit”试剂盒说明书步骤进行提取。  

2、PCR扩增

1）将Mix在4℃下融解，轻柔地上下颠倒混匀并进行短暂离心。

2）冰上配制下表中的反应液

成分	加入量	终浓度
PrimeSTAR Max Premix（2X）	15μL	1×
Forward Primer (10μM)	0.6μL	0.2 μM
Reverse Primer (10μM)	0.6μL	0.2 μM
DNA	100 ng
RNase-free Water	To30μL

3）将反应管进行短暂离心，确保所有反应液在反应孔底部。

4）采用三步法程序进行反应：

循环数	步骤	温度	时间
40	预变性	98℃	10s
	变性	55℃	5s
	退火	72℃	5s

1. 定量测序

• 技术优势

✅ 高通量：单次实验可分析数百至数万样本

✅ 支持单个位点检测（TaqMan）或大规模筛查（测序芯片）  

✅ 广泛兼容：适用于低浓度DNA样本。

• 适用范围

1️⃣ 临床诊断

2️⃣ 药物基因组学

3️⃣ 农业育种

4️⃣ 肿瘤研究

六、代表性实验结果