转: Annovar 软件注释流程介绍

第一步:下载Annovar

上Annovar官网下载(http://annovar.openbioinformatics.org/en/latest/user-guide/download/),现在要邮件注册后才能下载。邮件注册后会给你最新版软件下载地址,

下载后文件为annovar.latest.tar.gz。

第二步:安装Annovar

linux系统下用该命令解压

tar zxvf annovar.latest.tar.gz

解压后生成annovar文件夹,里面有6个perl脚本程序和两个文件夹,其中一个是example文件夹,另一个是已经建立好的hg19或者GRCh37的humandb的数据库文件夹,可用于人的注释。

第三步:使用Annovar

人的注释方法,官网介绍的很详细,但仅仅有人的数据库肯定是满足不了大家的需求。

下面以小鼠mm9为例子,介绍如何自己构建一个mousedb数据库。

先在annovar文件夹里面创建mousedb文件夹(名字可自取),命令

mkdir mousedb

然后使用annovar文件夹下的perl程序annotate_variation.pl

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以下是一个基于ANNOVAR进行基因注释的案例: 假设我们有一个人类基因组的VCF文件,其中包含某个人的基因信息。我们使用ANNOVAR对该文件进行注释,以了解这个人的基因情况。 1. 准备工作 首先,需要下载ANNOVAR软件并解压缩。然后,下载人类基因组参考序列和注释数据库,这些文件可从ANNOVAR官方网站获取。 2. 运行ANNOVAR 在终端窗口中,输入以下命令运行ANNOVAR: ``` ./annotate_variation.pl -downdb -buildver hg19 refGene humandb/ ``` 该命令将下载人类基因组参考序列和注释数据库,并将其存储在humandb目录下。 接下来,输入以下命令运行ANNOVAR进行注释: ``` ./annotate_variation.pl -out output -buildver hg19 -dbtype refGene input.vcf humandb/ ``` 其中,output是输出文件的前缀,input.vcf是待注释的VCF文件。运行结果将生成多个文件,包括注释结果文件(output.hg19_multianno.txt)和变异位点注释摘要文件(output.hg19_multianno.summary)。 3. 解读结果 注释结果文件包含了每个变异位点的注释信息,包括基因名称、录本名称、变异类型、功能影响等。下面是注释结果文件的一部分示例: ``` Chr Start End Ref Alt Func.refGene Gene.refGene ... ExonicFunc.refGene chr1 1000000 1000000 C G exonic AGRN ... nonsynonymous_SNV chr1 1000001 1000001 C T exonic AGRN ... synonymous_SNV chr1 1000002 1000002 C A exonic AGRN ... stopgain ``` 通过解读注释结果文件,我们可以了解到这个人的基因组中有哪些变异位点,以及这些变异位点可能对基因功能产生的影响。例如,第一行注释信息表明在AGRN基因的一个外显子区域中发生了一个非同义突变,可能会改变该基因的蛋白质编码序列。

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