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基因工程
文章平均质量分 79
这是一只菜狗啊
我的文档都没主动设置vip,有需要的单独找我,我给你开放,这个VIP是CSDN自己设的。
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基因工程-7-基因表达谱研究技术
7.1基因表达谱研究技术胚胎原位杂交技术胚胎抗体染色技术基因芯片技术蛋白质组学技术.7.1.1胚胎原位杂交技术原位杂交(in situ hybridization ,ISH ),是利用碱基互补配对的原理,用带有标记的目的DNA或RNA片段作为核酸探针,与胚胎或组织内的mRNA进行杂交,然后通过放射自显影、荧光显微镜观察或酶促底物显色的方法予以显示,确定目的基因的mRNA的存在和定位情况。(1)原位杂交探针探针与mRNA互补杂交结合,是负链的;正链探针可以作为对照进行实验;原创 2022-05-07 13:45:31 · 1859 阅读 · 0 评论 -
基因工程-6-阳性转化子的鉴定
6.1遗传表型检测法(1)抗药性筛选氨苄青霉素(Ampr);四环素抗性基因(Tetr);氯霉素抗性基因(Cmr,cat);卡那霉素抗性基因(Kanr);(2)插入失活筛选插入之后引起载体功能改变。常用插入失活法、插入表达筛选法、噬菌斑筛选法。环丝氨酸筛选法——插入失活效应筛选 环丝氨酸结构与丝氨酸相近,细胞分裂时掺入到新合成的肽链中,影响折叠会导致生长的细胞致死。 四环素插入失活的重组子由于不抗四环素生长受抑制。(3)蓝白斑筛选6.2 酶...原创 2022-04-29 21:05:49 · 3070 阅读 · 0 评论 -
基因工程-5-目的基因导入受体细胞的方法
外源基因导入受体细胞有多种方法,细胞类型不同,载体不同,导入方法也有差异。本章主要介绍将外源基因导入大肠杆菌细胞、导入酵母细胞、导入植物细胞以及导入动物细胞的不同方法。每种方法都有其独特的优点,但也有不足,因此,选择什么样的方法将外源基因导入受体细胞,需要根据具体情况来确定。5.1.1 自然条件下的转化过程5.1.2感受态受体细胞选择限制缺陷型 hsdR-:增大外源DNA的可转化性。重组缺陷型 rec-:转化亲和性:用于基因工程的受体细胞必须对重组DNA分子具有较高的可转化性。遗原创 2022-04-23 22:23:21 · 18467 阅读 · 0 评论 -
细胞工程-7-单倍体诱导
植物开花前后花的不同授粉前◼花药(花粉细胞)、未授粉的胚珠、未授粉的子房授粉后◼胚、授粉后的胚珠和子房、胚乳思考:✓培养的目的意义?得到纯合的基因型(单倍体染色体加倍之后是纯合)、单倍体植株便于诱变✓取材上的要求?花药(花粉细胞)、未授粉的胚珠、未授粉的子房授粉后✓材料预处理及培养方法、培养条件上的差异?✓离体培养时再生过程上的差异?✓再生植株上的差异?第一节 单倍体及单倍体育种一、单倍体的概念及其来源1.概念单倍体(haploid原创 2022-04-19 20:12:15 · 1279 阅读 · 0 评论 -
基因工程-4-目的基因的获取与制备
4.1基因文库获取目的基因基因文库(gene library)指细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体。4.1.1.1构建过程1.细菌染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备;载体DNA的准备;载体与基因组大片段DNA的连接;体外包装基因组DNA文库的扩增;重组DNA的筛选和鉴定;DNA的制备尽量保证DNA有足够的长度,片段之间有重叠。采用低熔点琼脂糖包埋固定法。直接将真核细胞包埋在低熔点琼脂糖中,在凝胶块中完成细胞的原创 2022-04-09 01:23:19 · 6153 阅读 · 0 评论 -
基因工程-3-基因工程载体-课堂随记(PPT、补充)
溶源周期:随着细菌进行复制溶菌周期:细菌最后裂解基因组大小>重组λ噬菌体的基因组DNA太大或太小会影响其存活能力。(不能不插入、也不能插入太长)>当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组DNA的78%-105%时,不会明显影响存活能力。>野生型入噬菌体基因组DNA为48 kb,若用外源DNA片段完全替换可取代区,外源DNA片段的大小将在9-23kb范围内。lacZ基因(颜色)lacZ基因也可用于入噬菌体载体,通过插入或替换载体中的β-半乳糖苷酶基因片段,在IPTG/X-g原创 2022-03-27 15:52:23 · 1623 阅读 · 0 评论 -
基因工程-3-基因工程载体
导读把目的基因导入到受体细胞中的工具叫做基因工程载体。基因工程载体包括克隆载体和表达载体两大类。克隆载体包括:质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体和人工染色体载体。 表达载体包括:原核表达载体、酵母表达载体和哺乳动物细胞表达载体。基因工程的目的就是把一个外源基因导入到受体细胞中并在受体细胞中内扩增、繁殖、表达并不断稳定的遗传下去。首先目的基因不能单独进入受体细胞:第一,裸露的DNA一般进入不了细胞,因为细胞一般具有保护屏障,如细胞膜细胞壁等防护细胞免受外来物的侵袭。 第二,即使DNA进入细原创 2022-03-27 15:43:26 · 12722 阅读 · 1 评论 -
基因工程-2-基因工程工具酶
目录基因工程工具酶工具酶的定义限制性内切酶细菌的限制-修饰系统一般来说,一种限制性核酸内切酶只识别一种特定序列。同尾末端的连接影响酶切的因素应该记的缩写:终止酶切的方法星活性PCR引物末端引入酶切位点DNA连接酶DNA聚合酶大肠杆菌DNA聚合酶ⅠKlenow大片段酶作用:耐热DNA聚合酶TaqT4噬菌体DNA聚合酶逆转录酶PfuDNA聚合酶碱性磷酸酶T4多核苷酸激酶S1核酸酶末端脱氧核苷酸转移酶基因工原创 2022-03-05 09:31:40 · 2658 阅读 · 0 评论 -
基因工程概述
基因工程基本概念基因操作:对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。基因工程:专指为实践应用而进行的基因重组事件,产生的基因工程体可以用作生物反应器,或改变了生物性状的工程体等基因工程(基因操作):主要是利用DNA重组技术,将生物的某个基因或一个DNA片段通过基因载体(DNA载体)运送到另一个生物的活性细胞中,然后经过克隆和行使正常功能(表达),从而创造生物新品种或新物种的遗传学分子技术(从细菌到高等生物)。GMO:Genetically Modified Organi原创 2022-02-27 16:23:40 · 1156 阅读 · 0 评论 -
基因工程技术-入门概述(双语)
基因工程(Genetic engineering)又称为遗传工程、转基因、基因修饰,是一种使用生物技术直接操纵有机体基因组、用于改变细胞的遗传物质的技术。包括了同一物种和跨物种的基因转移以产生改良的或新的生物体,以此将新的遗传物质插入到宿主基因组中。可以使用核酸酶除去或“敲除”基因。基因靶向是使用同源重组来改变内源基因的不同技术,并且可以用于缺失基因,去除外显子,添加基因或引入点突变。转载 2022-02-27 14:19:14 · 2405 阅读 · 0 评论