Biochimie杂志|探究蜘蛛葡萄状腺丝高韧性的秘密

蜘蛛丝因其优异的力学性能和良好的生物相容性，近年来一直受到研究人员的广泛关注。

2024年10月30日温州医科大学彭政、温睿老师团队在Biochimie杂志上发表了题为“Mechanical and structural features of three AcSp proteins underlie thediverse material properties of aciniform silks of Neoscona spiders”的论文。

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1、研究背景

研究发现，圆网蜘蛛具有 7 种类型的产丝腺体，能够分泌 6 种丝纤维以及一种湿胶，而且每种丝纤维都表现出独特的生物学功能和材料学特性。这些丝纤维中，葡萄状腺丝具有最强的韧性，它结合了高延展性（86 ± 3 %）和强度（687 ± 56 MPa），使其非常适合于猎物固定和形成卵袋内部结构。确定葡萄状腺丝极高韧性的分子基础是理解仿生研究的关键，旨在创造这种超坚韧丝的优良材料性能。

文献解读

研究人员从类青新圆蛛Neoscona scylloides的葡萄状腺丝中鉴定了三个主要蛛丝蛋白（AcSp1A、AcSp1B和AcSp2），并给出了它们的全长编码基因序列（图1）。序列比较发现，与其他蜘蛛类似，这三种AcSp也有相对较短且保守的非重复N端和C端区域，这些区域位于一个较长的中心重复区域的旁边。虽然不同AcSp中心重复序列之间的长度和序列存在差异，但是他们都具有复杂性和极端的基因内均质化的特征（图5）。

图1.AcSp1A、AcSp1B和AcSp2的序列和结构模型。 

 表达水平分析表明，三个AcSp mRNA水平在葡萄状腺中远比其他腺体内高，其中AcSp1B的表达水平最高，其丝氨酸含量高于其他两种AcSp蛋白，而AcSp2的mRNA水平很低（图2）。Swiss模型程序预测了N. theisi, N. scylloides, and A. ventricosus的AcSp末端结构域的三级结构并对其质量和可靠性做了评估。所有AcSp N端区域均符合5个螺旋域的典型蜘蛛蛋白三级结构（图3A）。与已知蛛丝蛋白的结构的相似度一致（图3B）。同时C端域三级结构预测结果为具有四个螺旋的反平行二聚体，这与已知C末端结构一致为（图3A和B）

图2.AcSp1A、AcSp1B和AcSp2的表达、氨基酸组成和亲水性 

 图3.来自A. ventricosus, N. theisi, and N. scylloides.的AcSp1A、AcSp1B和AcSp2的末端区域的Swiss模型

此外，研究人员还表达了三种重组AcSp蛋白，这些蛋白可以在生理缓冲液中通过剪切力诱导形成纤维(图4)。力学性能测试结果显示三种重组纤维具有相似的延展性，但NRCAcSp1B纤维比其他两种纤维具有更高的拉伸强度，使其韧性显著提高(图5)。FTIR光谱法测定二级结构含量发现三种重组纤维中NRCAcSp1B纤维的β-sheet含量最高，这与其含有丰富的丝氨酸有关。较多的β-sheet 是AcSp1B的纤维在三种AcSp重组纤维中具有最强的拉伸强度的原因。与手工拉伸纤维相比，天然纤维的直径更小（<1μm）（表1）。研究人员通过不同来源（N. theisi and N. scylloides）纤维的力学性能比较，发现N. theisi来源的纤维拉伸强度高于N. scylloides来源的纤维（表1），这可能是由于两种AcSp1蛋白的表达水平不同所致。

 图4. 三种重组纤维的形态学表征和力学性能。

 

 图5. 三种重组纤维的结构性能

葡萄状丝是多种AcSp蛋白的复杂混合物，不同AcSp拥有不同的生物物理性质，所以AcSp不同的组装形式会影响材料的性质。文章详细描述了圆网蜘蛛N. scylloides.葡萄状丝的分子组成。三个AcSp的变体在不同物种间具有相同或相似的一级结构（包括它们的氨基酸组成和重复序列的数量）。但是AcSp1A和AcSp1B在Neoscona spiders中的表达模式却存在显著差异，表明这两个基因可能在不同物种间进化出不同的生物学功能。鉴于这三种AcSp变体在物种内和跨物种间存在广泛的丰度差异，进一步了解它们潜在的分子特性和变异之间的相互作用，将有助于阐明葡萄状丝材料特征的分子机制。