转录组测序
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wangchuang2017
天下才子,中州过半
惟楚有才,于斯为盛
实事求是,知行合一
师者,所以传道,授业,解惑也
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【转录组】如何进行序列比对?
经过原始数据的质量评估,去除低质量、含N、含接头等reads的步骤后,我们得到了clean data,然后我们就需要进行序列比对了。序列比对的目的是:定位,也就是确认每条reads是否在基因组/转录组上以及找到它的位置。同时依据结果进行相关的质控,来判断实验是否有问题、样本是否存在污染、数据量是否足够、reads的位置是否有偏好性等。在转录组分析中,可能会进行两次比对,一次是将reads比对到基因组上,一次是将reads比对到转录本/基因上。其中比对到转录本/基因上是必须的,比对到基因组上...原创 2021-02-25 16:49:25 · 4920 阅读 · 0 评论 -
基因拼接
基因组拼接方法de novo定义:from the beginning(从头拼接), no reference genome guided(无参考基因组)三类de novo基因拼接的计算方法:1. Greedy algorithm:对于含重复区的序列拼接效果不好Shortest common string (SCS):最短的、包含原序列S中所有的k-mer的序列但是Greedy algorithm为追求最短的序列或者最多的重叠,出现了“吃掉”重复区间的问题。2. Overlap La原创 2021-02-20 11:28:58 · 2783 阅读 · 0 评论 -
基于RNA测序技术的转录组从头拼接算法研究
基于RNA测序技术的转录组从头拼接算法研究摘要:生物信息学主要研究分子生物学领域,而对于分子生物学领域,转录组的从头拼接又是其核心内容,即利用转录组的测序片段拼接出整个转录组中的所有表达的转录体。而RNA测序的出现,在计算上给转录组的拼接提供了一定的挑战。在目前,转录组的拼接算法主要是基于参考基因组的拼接方法与从头拼接方法。虽然基于参考基因组的方法比从头拼接方法更有突破性,不过基于参考基因组的拼接方法,仍然存在着一定的致命缺点,即为要有一个高质量的参考基因组。而从实际情况分析,绝大多数的生物根本不.原创 2021-02-20 11:28:01 · 2213 阅读 · 1 评论 -
应用第二代测序技术的转录组组装
目录Next-generation transcriptome assembly 应用第二代测序技术的转录组组装... 2第一部分:总体介绍挑战与机遇... 2第二部分:实验提取与数据分析... 2组装前:... 2组装策略:... 3选择策略... 4选择组装软件... 4评价组装的质量... 5总结和未来的展望... 5全文完... 5Next-generation transcriptome assembly 应用第二代测序技术的转录...原创 2021-02-20 11:06:03 · 1169 阅读 · 0 评论 -
转录因子详细介绍(motif)
转录因子详细介绍(motif)TF: transcription factor转录因子TFBS: transcription factor binding site转录因子结合位点TFBS是序列内的location,TF特异结合在这里,这个site有这种特点1 和一些参考相关的一个位置(开始,结束,strand),这些reference可以是染色体开始,geneTSS。也可以是一段sequence2 A SITE可以是实验证实的(已知的),也可以是一些算法(预测的)3 例子,下面这个图是酵母原创 2021-02-20 10:59:19 · 21464 阅读 · 1 评论 -
全长转录组之基因和转录本鉴定
折叠转录本 分析目的:基于基因组比对结果,将相似的多转录本折叠成单个转录本(去冗余) PacBio分析软件: TAMA:https://github.com/GenomeRIK/tama TAMA简介 TAMA(T ranscriptome A nnotation by M odular A lgorithms 是一款设计用于处理 Iso Seq 数据和其他长 reads 转录本数据,该软件 2019 年 在预印本在线期刊( bioRxiv )发表 。 Illumin...转载 2021-01-30 20:56:59 · 2810 阅读 · 0 评论 -
PNAS:利用long-read生成个人转录组
编辑推荐: 斯坦福大学医学院的遗传学教授Michael Snyder及其同事利用Pacific Biosciences系统,对三个家庭成员的类淋巴母细胞转录组进行了测序,并将获得的reads与Illumina平台上获得的较短reads进行比较。通过这些转录组,他们开发出一名家庭成员的等位基因特异的全长转录组。生物通报道 斯坦福大学的研究人员利用一种基于long-read的方法,生成了个人的转录组。这项成果于近日发表在《美国国家科学院院刊》上。文章的通讯作者是斯坦福大学医学院的遗传学教原创 2021-01-29 20:21:33 · 335 阅读 · 0 评论 -
转录组的技术应用 (生物学、医学、农学中的应用)
转录组的技术应用序言 转录组技术在生物学、医学、农学中的应用 随着第二代测序技术的迅猛发展,其高通量、快速、低成本的特点成为越来越多的生物学研究者在解决生物学问题时的首选,尤其在转录组测序方面更显示出极大的潜力。转录组(transcriptome)是指特定生物体在某种状态下所有基因转录产物的总和,转录组研究是功能基因组研究的一项重要内容。转录组是连接基因组遗传信息与生物功能(蛋白质组)的必然纽带,同时相对于真核生物全基因组测序来说,转录组测序得到的序列不含有内含子及其它非编码序列,因此转录组测..原创 2021-01-25 17:03:12 · 7119 阅读 · 0 评论 -
转录组测序和RNA-seq
转录组测序和RNA-seq是一样的,他们的关系zhi如下:转录组测序的方法很多,而RNA-seq是当zhuan前转录组测序的一种测序方法,又称为二代测序,包括454,solexa等。RNA-seq即转录组测序技术,就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等或者其中一些用高通量测序技术把它们的序列测出来。反映出它们的表达水平。 数字基因表达谱升级版(RNA-Seq)是用来研究某一生物对象在特定生物过程中基因表达差异的技术。该技术结合了转录组测序建库的实验方法与数字...原创 2021-01-23 16:47:57 · 4810 阅读 · 1 评论 -
数据标准化
image.pngimage.pngimage.pngRPKM/FPKM推荐使用TPM箱式图image.pngairway数据集简介image.png# 魔幻操作,一键清空rm(list = ls()) options(stringsAsFactors = F) #设置全局变量# 加载airway【数据包】数据集并转换为表达矩阵library(airway,quietly = T) #禁止显示动态信息da...原创 2021-01-17 15:27:08 · 734 阅读 · 1 评论 -
转录组背景、环境设置(目录管理)
image.pngimage.png文献学习 【要做笔记】1.A comprehensive evaluation of normalization methods for illuminating high-thoughput RNA sequencing data analysisMethods to study splicing from high-throughput RNA sequencing data survey of best practices for RNA-..原创 2021-01-17 14:00:55 · 233 阅读 · 0 评论 -
一二三代测序 新
转录组测序原理颤抖吧__小虫子已关注22019.05.12 11:08:33字数 4,075阅读 8,372Author:ligcDate:19/5/121. 一代测序(Sanger sequencing)双脱氧链终止法采用DNA复制原理。 Sanger测序反应体系中包括目标DNA片段、脱氧三磷酸核苷酸(dNTP)、双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)、测序引物及DNA聚合酶等。 测序反应的核心就是其使用的ddNTP:由于缺少3'-OH基团,不具有与另一个dNTP连接形成磷酸二酯键的能力原创 2023-08-21 10:08:32 · 800 阅读 · 0 评论 -
目前有没有好用的RNASeq的pipeline呢?
目前有没有好用的RNASeq的pipeline呢?有没有那种把Tophat、Cufflinks、Samtools以及找差异表达基因这些功能整合在一起的RNASeq的pipeline呢,我到GALAXY和GENEPATTERN上找过,好像都没有一个能完整地完成初步分析RNASeq流程的pipeline。给你推荐一篇protocol,可以参阅以下。Differential gene and transcript expression analysis of RNA-seq experiments w原创 2020-12-06 16:49:37 · 778 阅读 · 0 评论 -
基因组学大牛谈long-read测序
基因组学大牛谈long-read测序首页 » 研究 » 组学 2014-09-16 生物通 赞(2)分享:导读 Mendelspod网站近日发布了一个“Long Read测序的崛起(The Rise of Long Read Sequencing)”的系列访谈。主持人Theral Timpson就long-read测序采访了基因组学领域的一些大牛。第一位受访者是斯坦福大学的Mike Snyder。 网站近日发布了一个“Long Read测序的崛起(The Rise of Long Re...原创 2020-11-30 09:31:06 · 2370 阅读 · 0 评论 -
Nature Communications∣开花过程中,拟南芥茎尖分生组织基因表达和组蛋白标记的时空动态
Nature Communications∣开花过程中,拟南芥茎尖分生组织基因表达和组蛋白标记的时空动态闫宗运微信公众号:植物科学SCI关注他1 人赞同了该文章本文为2017年5月Nature Communications文章,原题目为:Temporal dynamics of gene expression and histone marks at the Arabidopsis shoot meristem during flowering摘要:植物可以通过位于其生原创 2020-10-12 16:49:28 · 1183 阅读 · 0 评论 -
一个植物转录组项目的实战
转录组转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有 RNA 的总和,包括 mRNA 和非编码 RNA 。通过转录组测序,能够全面获得物种特定组织或器官的转录本信息,从而进行转录本结构研究、变异研究、基因表达水平研究以及全新转录本发现等研究。其中,基因表达水平的探究是转录组领域最热门的方向,利用转录组数据来识别转录本和表达定量,是转录组数据的核心作用。由于这个作用,他可以不依赖其他组学信息,单独成为一个产品项目RNA-seq测序。所以很多时候转录组测序会与RNA-seq混为一谈。原创 2020-10-11 10:58:51 · 1617 阅读 · 0 评论 -
生物信息学入门知识
1957年9月,克里克在论文“论蛋白质合成”中正式提出,遗传信息流的传递方向是:DNA→RNA→蛋白质,后来被称为“中心法则”。中心法则的基本内容:遗传信息是DNA上的核苷酸序列 基因表达包括转录(transcription)和翻译(translation)两个阶段 转录(transcription):生物体以DNA为模板合成RNA的过程,是基因表达的核心步骤 翻译(translation):生物体以mRNA为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程二代测序生物信息学分析现在分析..原创 2020-09-24 08:59:16 · 5442 阅读 · 1 评论 -
转录组测序技术和结果解读(十三)——WGCNA分析
WGCNAWGCNA(weighted correlation network analysis) 是一款基于R语言的加权关联网络分析软件,可以实现将基因表达变化与表型差异的关联,从而挖掘在表型变化过程中发挥关键作用的核心基因或基因模块 (moudle)。WGCNA与其它类似分析软件的区别在于,其在构建基因共表达网络的过程中添加表型权重参数,同时使用无尺度聚类和动态剪切树的方式优化分类,以实现对数据准确、高效的分析。分析的流程WGCNA的分析原理及过程如下:对数据进行预处理; 构建分.原创 2023-08-14 17:22:42 · 3338 阅读 · 0 评论 -
转录组测序技术和结果解读(十二)——共表达网络
共表达网络基因共表达分析可以揭示转录调控的机制,选定一组基因,通过分析在不同样品中基因间表达量的相关性,构建基因间的共表达网络,从而可以明确其中的相互作用关系。解决的问题共表达网络的分析结果可以解决下述问题:筛选与所关注的表型性状相关的核心基因; 预测基因间的调控关系和未知基因的功能;分析流程共表达网络的大致分析流程如下:对任意两个基因,采用Spearman方法计算二者相关系数; 选取合适的阈值对相关性结果进行筛选; 根据相关性结果绘制基因共表达网络; 对共表达网络进行模块原创 2023-08-14 17:22:29 · 1080 阅读 · 0 评论 -
转录组测序技术和结果解读(十一)——表达模式聚类
当转录组研究的样本分组超过2组时,由于差异表达基因的识别只能针对两组样本,因此,只通过差异表达基因无法分析整体上的基因表达变化规律,此时可以通过表达模式聚类将基因按照其在不同样本中的表达变化规律进行归类,进而推测其与特定功能的可能联系。表达模式聚类热图以各样本中基因的表达量绘制热图,在图中每列表示一个样本,每行表示一个基因,图中的颜色的深浅表示基因在该样本中的表达量。表达模式聚类热图图像左侧的聚类数表示各个基因在所有样品中表达规律的相似性,在聚类中分支越近的基因,其表达量的变化规律就越接原创 2023-08-14 17:22:14 · 2170 阅读 · 0 评论 -
转录组测序技术和结果解读(二)——文库构建和测序策略
文库构建转录组测序文库是以样本的Total RNA为基础,从中提取mRNA构建测序文库,因此文库构建包括mRNA富集和碎片化、mRNA反转录、接头添加和PCR富集等过程。文库构建流程mRNA富集在生物的Total RNA中,mRNA所占比例很低,绝大部份时核糖体RNA (rRNA),因此如果直接使用Total RNA进行测序,得到的结果必然是不准确的,因此需要先将Total RNA中的mRNA分类纯化出来。转录组测序的文库根据待测样品的物种分为真核转录组和原核转录组。由于真核生物和原原创 2020-09-22 21:39:40 · 6739 阅读 · 1 评论 -
转录组测序技术及结果解读(一)——测序样品设置及选择
转录组测序转录组 (transcriptome)是指特定生物体在某种状态下所有基因转录产物的总和,转录组研究是功能基因组研究的一项重要内容,转录组是连接基因组遗传信息与生物功能 (蛋白质组) 的必然纽带。RNA-seq也称为全转录组鸟枪测序,应用高通量测序技术对样品中的mRNA、small RNA和non-coding RNA进行测序的技术,其中针对mRNA的RNA-Seq测序即为转录组测序。RNA-Seq可进行全基因组水平的基因表达差异研究,具有定量更准确、可重复性更高、检测范围更广、分析更可靠.原创 2020-09-22 21:38:33 · 9886 阅读 · 0 评论